根據結合基團的不同,Ni2+親和層析柱可分為倆類:Ni-IDA瓊脂糖凝膠和Ni-NTA瓊脂糖
凝膠。Ni2+有六個螯合價位,其中Ni-IDA螯合了三價,Ni-NTA螯合了四價。所以IDA的載量要比NTA的高,但其弱的結合力使金屬離子在洗脫階段時很容易浸出,與目的蛋白緊密結合,從而導致分離蛋白產量偏低,產品不純及金屬離子污染等問題。而NTA的顆粒粒度均勻,粒徑更小,并且螯合鎳更穩定,能耐受較高的還原劑,使填料更加穩定,鎳離子不易脫落。
如果你追求高產量,而對蛋白純度的要求并不高,那么可以選用鎳IDA-瓊脂糖凝膠;如果對蛋白純度要求高的話,那么鎳NTA-瓊脂糖凝膠則是*。
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