DMEM低糖培養基的知識概述與應用！

一、背景

DMEM低糖培養基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基，是在MEM培養基的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于細胞停泊于一個位置生長，適于生長較快、附著較困難腫瘤細胞等。

DMEM是dulbecco's modified eagle medium的縮寫，所以其特點主要包括以下:(1)氨基酸含量為依格爾培養基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等;(2)維生素含量為依格爾培養基的4倍;3)含有糖酵解途徑中的重要物質--丙酮酸;(4)含有微量的鐵離子。

DMEM培養基主要有以下用途：用于成纖維細胞、神經元細胞、內皮細胞、雜交瘤細胞（SP2/0）、表皮喉癌細胞（HEP-2）、Hela（宮頸癌細胞）、CHO（中國倉鼠卵巢細胞）等細胞的培養,用于疫苗企業病毒株的傳代培養供后續抗原的制備,用作動物疫病病毒采樣及病毒分離和維持液的基礎液、免疫治療用細胞培養基礎液以及人病毒分離用生長液及維持液的基礎液。

二、應用

用于紅景天苷對高糖誘導人臍靜脈內皮細胞損傷的保護作用研究：

探討紅景天苷對高糖損傷人臍靜脈內皮細胞的保護作用。

方法：體外培養人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)株貼壁后,以MTS法觀察不同葡萄糖濃度對人臍靜脈內皮細胞的細胞活力影響,根據結果選擇糖濃度5.5mmol/L作為正常對照組,糖濃度45mmol/L組作為模型損傷組。

以MTS法觀察不同紅景天苷濃度對正常培養的人臍靜脈內皮細胞活力的影響；不同劑量紅景天苷作用于高糖損傷的人臍靜脈內皮細胞組,分組為正常對照組、模型損傷組、紅景天苷不同劑量組(低劑量組、中劑量組、高劑量組、*劑量組),通過MTS法檢測細胞活力、WST-1法測定細胞內超氧化物歧化酶(SOD)活力、TBA法測定細胞內丙二醛(MDA)含量來評估紅景天苷對高糖誘導人臍靜脈內皮細胞損傷的保護作用。

結果：不同紅景天苷濃度培養的正常人臍靜脈內皮細胞差異無統計學意義(24 h F=0.220,p=0.93;48 h F=0.106,p=0.98)。與模型損傷組比較,細胞培養24 h、48h,紅景天苷中劑量組、高劑量組、*劑量組細胞活力均明顯增加(P<0.05)。細胞內MDA含量均明顯下降(P<0.05),細胞內SOD活力均明顯增加(P<0.05);紅景天苷低劑量組4 8h細胞活力高于模型損傷組(P<0.05),細胞內MDA含量下降(P<0.05)。

結論：

1、糖濃度45mmol/L可以作為高糖損傷HUVEC的糖濃度;高糖可以降低HUVEC的細胞活性,該損傷作用是通過抑制HUVEC的SOD活性,增高HUVEC的MDA含量來實現的。

2、紅景天苷可以恢復高糖損傷的HUVEC細胞活力,為細胞提供保護作用。該保護作用是通過增強高糖損傷的HUVEC的SOD活性,降低高糖損傷的HUVEC的MDA含量實現。

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