高分辨率溶解(HRM)作為一種聯(lián)管式的PCR后分析技術(shù),引起了學(xué)術(shù)界的廣泛關(guān)注。HRM基于DNA雙鏈的溶解特性對PCR產(chǎn)物進行分析,與傳統(tǒng)的溶解曲線分析類似,但提高更多的信息,因而具有更廣泛的應(yīng)用。可根據(jù)PCR產(chǎn)物的序列、長度、GC含量或鏈互補性來區(qū)分樣品,其靈敏度可區(qū)分單個堿基的差別。現(xiàn)在可以通過這種高效、直接的方法檢測、分析未知的甚至復(fù)雜的序列。離心式設(shè)計及其出色的光學(xué)和溫度表現(xiàn)令其得以勝任HRM。
實時熒光定量PCR儀保養(yǎng)及維護:
1、儀器表面清潔
儀器的表面應(yīng)定期用軟布加少量清水擦洗,清洗后將儀器擦干。若有試劑泄漏在儀器表面,應(yīng)用軟布加70%酒精擦拭干凈。
2、反應(yīng)孔清潔
反應(yīng)孔沾染灰塵或雜質(zhì)后,會影響PCR擴增和熒光檢測,因此要定期清潔,一般3個月一次,可用吹氣球輕輕吹拭。為了防止灰塵進入反應(yīng)孔,儀器不使用時,必須關(guān)閉滑蓋。若有試劑進入樣本孔內(nèi),應(yīng)用無塵軟布加70%酒精擦拭干凈。清潔儀器前必須關(guān)閉電源,并拔掉電源線。不要將液體傾倒在反應(yīng)模塊中或者儀器內(nèi)部。不能用強腐蝕性溶劑或者有機溶劑擦洗儀器。
3、保護儀器
不要頻繁開關(guān)儀器,兩次開關(guān)間隔時間不得低于30秒。實驗結(jié)束后不要立即關(guān)閉電源,保持待機狀態(tài)10分鐘后(此時儀器內(nèi)部風扇仍在持續(xù)工作),待模塊溫度降至室溫再關(guān)閉電源。請使用原廠商提供的電源線和通訊線。
4、更換保險絲
儀器裝有兩個10A保險絲,用以保護儀器。當保險絲發(fā)生損壞后,用戶可按如下方法更換保險絲:切斷主機電源,并拔掉電源線;用一字螺絲刀逆時針擰開保險絲盒蓋子,取出保險絲并更換新的保險絲);將保險絲盒蓋子按順時針方向擰,使之蓋緊,插上電源線即可。
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