手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
全自動膜片鉗技術(shù)簡介
全自動膜片鉗技術(shù)（Automated patch clamp technique）的出現(xiàn)標(biāo)志著膜片鉗技術(shù)已經(jīng)發(fā)展到了一個嶄新階段，從這個意義上說，前面所講的膜片鉗技術(shù)我們稱之為傳統(tǒng)膜片鉗技術(shù)（Traditional patch clamp technique）。離子通道是藥物作用的重要靶點，膜片鉗技術(shù)被稱為研究離子通道的“金標(biāo)準(zhǔn)”。美國食品及藥物管理局（FDA）規(guī)定，非心臟類新藥必須有其對心臟hERG鉀通道是否抑制的膜片鉗研究結(jié)果，否則新藥不得用于臨床。
傳統(tǒng)膜片鉗技術(shù)每次只能記錄一個細(xì)胞（或一對細(xì)胞），對實驗人員來說是一項耗時耗力的工作，它不適合在藥物開發(fā)初期和中期進行大量化合物的篩選，也不適合需要記錄大量細(xì)胞的基礎(chǔ)實驗研究。全自動膜片鉗技術(shù)的出現(xiàn)在很大程度上解決了這些問題，它不僅通量高，一次能記錄幾個甚至幾十個細(xì)胞，而且從找細(xì)胞、形成封接、破膜等整個實驗操作實現(xiàn)了自動化，免除了這些操作的復(fù)雜與困難。這兩個優(yōu)點使得膜片鉗技術(shù)的工作效率大大提高了！
不同的全自動膜片鉗技術(shù)所采用的原理也不*相同，大體上有如下幾種：
1. Flip-Tip翻轉(zhuǎn)技術(shù)：將一定密度的細(xì)胞懸液灌注在玻璃電極中，下降到電極的單個細(xì)胞通過在電極外施加負(fù)壓可以與玻璃電極形成穩(wěn)定的高阻封接，打破露在玻璃電極開口外的細(xì)胞膜就形成了全細(xì)胞記錄模式。德國Flyion公司的Flyscreen 8500系統(tǒng)采用的就是這一技術(shù)，其通量zui高為6，即一次可同時記錄6個細(xì)胞。它的顯著特點是：（1）仍然采用玻璃毛坯作為電極；（2）藥物施加微量、快速。
2. SealChip技術(shù)：*摒棄了玻璃電極，而是采用SealChip平面電極芯片，一定密度的細(xì)胞懸液灌注在芯片上面，隨機下降到芯片上約1-2μm的孔上并在自動負(fù)壓的吸引下形成高阻封接，打破孔下面的細(xì)胞膜形成全細(xì)胞記錄模式。采用這一技術(shù)的美國Axon（MDS）公司的PatchXpress 7000A系統(tǒng)是高通量全自動膜片鉗技術(shù)的*，是離子通道藥物研發(fā)的革命性工具，在國外實驗室和制藥廠廣泛用于hERG通道藥理學(xué)的研究。其通量zui高為16，即一次可同時記錄16個細(xì)胞。同時，其藥物施加微量、快速，不僅用于藥物篩選，還大量用于離子通道的基礎(chǔ)研究。
3. Population Patch Clamp技術(shù)：同SealChip技術(shù)一樣，*摒棄了玻璃電極，而是采用PatchPlate平面電極芯片。該芯片含有多個小室，每個小室中含有很多1-2μm的封接孔。在記錄時，每個小室中封接成功的細(xì)胞數(shù)目較多，獲得的記錄是這些細(xì)胞通道電流的平均值。因此，不同小室其通道電流的一致性非常好，變異系數(shù)很小。美國Axon（MDS）公司采用這一技術(shù)研發(fā)出了全自動高通量的IonWorks Quattro系統(tǒng)，成為藥物初期篩選的“金標(biāo)準(zhǔn)”。
此外，同SealChip技術(shù)一樣采用平面電極芯片，但只含有一個封接孔的小型全自動膜片鉗設(shè)備也已經(jīng)問世。這種小型設(shè)備代替了顯微鏡、防震臺/屏蔽網(wǎng)和微操縱器，一次只記錄一個細(xì)胞。雖然通量不高，但是由于封接破、膜等過程為自動化，工作效率也有顯著提高。德國Nanion公司的Port-a-Patch就是這樣的全自動膜片鉗設(shè)備。
全自動膜片鉗技術(shù)采用的標(biāo)本必須是懸浮細(xì)胞，像腦片這類標(biāo)本無法采用。此外，全自動膜片鉗技術(shù)只能進行全細(xì)胞記錄模式、穿孔膜片鉗記錄模式以及細(xì)胞貼附式單通道記錄模式，而不能進行其他模式的記錄。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心