紫外可見分光光度計是分析測試實驗室里常見的一種分析儀器,用于測定被測物質在一定波長照射下所產生的吸光度的大小,從而實現對物質進行定性或定量分析。在平時的日常教學及到企業調研時,發現在分光光度計使用問題上,使用者多多少少都存在一些疑惑或使用不規范的問題,下面就常見的一些問題進行討論。
關于儀器的預熱問題
在一般分光光度計的使用說明書上,要求儀器預熱時間約20分鐘;若是帶微處理器的分光光度計,開機后儀器自動進入自檢 (初始化 )狀態,約需1O分鐘左右。在分光光度計預熱這個環節上,很多使用者或多或少存在問題,如開機只預熱電路系統 (不調節波長、打開吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過程就是預熱等等。
對帶微處理器有自檢功能的分光光度計,開機后儀器自檢 (初始化)結束后,在測定窗口上,設置所需波長值,用一個吸收池裝上純凈水置于光路上,調 “0000A”后,預熱儀器,當儀器顯示讀數不再變化后即可進行測定。
對于紫外可見分光光度計,由于有雙光源 (鎢燈與氘燈), 為了延長燈的使用壽命,開機自檢完成后可以關掉測定時不用的光源燈。
2關于波長準確度的檢查與校正
日常在使用分光光度計時,是否要經常進行儀器波長準確度的檢查 ?答案是否定的。當在日常測定中發現儀器測定靈敏度下降,這時才應進行波長準確度的檢查,最簡易的檢查方法 (粗檢 )是:儀器開機后,調節波長為 580nm,在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙,若能觀察到一長方形 的黃色光斑,說明波長準確度屬正常范圍,否則就應進行波長校正。
當儀器經過長途搬運、受過機械振動或更換光源燈泡后,必須進行波長準確度的檢查與校正。粗檢同上,其校正方法有:干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法、利用氘燈的特征發射線校正法。具體步驟可參考儀器使用說明書。
3關于吸收池的使用問題
按照吸收池使用的基本順序分說如下:
(1)吸收池的潤洗
吸收池裝液前必須用待裝溶液潤洗 2~3遍,潤洗前是否要用純水先潤洗一遍呢?這可看具體情況區別對待。
如果初次用干的吸收池裝待測液 (特別是有色溶液)時,從維護保養吸收池的角度講,為減小其干玻面對顏色的吸附能力,便于用后吸收池的清洗,建議先用純水潤洗一遍,再用待裝溶液潤洗 2~3遍;若后再用此吸收池裝濃度相近或更高濃度的溶液 (如從小到大測定標準系列溶液的吸光度)時,可直接用待裝溶液潤洗2~3遍即可。
標準曲線法定量時,如果是先測定標準系列溶液的吸光度,當測到樣品溶液時,由于測定的樣品溶液濃度比最后一個標準溶液的濃度低或不可知時,建議先用純水潤洗一遍,再用待裝溶液潤洗 2~3遍。
(2)吸收池的裝液、擦拭與放置 吸收池潤洗完成后注入待測溶液至池高的 2/3~3/4處。
(3)吸收池成套性檢驗及處理 新吸收池或吸收池使用一段時間后都必須進行成套性檢驗.
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