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分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。是根據物質的吸收光譜和光的吸收定律，對物質進行定量、定性分析的一種儀器分析方法。
影響分光光度計分析結果準確性的因素有以下幾個：
1、波長準確度
由于儀器的制造和調整誤差，單色光的實際波長與儀器的波長讀數值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度，對波長準確度要求允許寬些。但是，當吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側邊緣比較陡直，此時波長準確度的影響就必須引起注意。
2、透射比(吸光度)準確度
透射比或吸光度的誤差越大,測試結果的可信性越差,從而影響到測試數據的準確性。
3、雜散光
雜散光是由于光學元件制造誤差以及光學和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也隨之增大，將給分析結果帶來一定的誤差。在紫外的短波區域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱，雜散光的影響更不能忽視。因此，雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標。
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