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模型動物小課堂(一):常用6個動物模型SOP

來源:遼寧長生生物技術股份有限公司   2021年10月26日 11:50  
  1、肺纖維化模型
 
  大鼠肺纖維化模型
 
  SD大鼠,鼠齡6-8周齡,體重200g左右,氣管內給藥。稱重大鼠,麻醉后將大鼠仰臥固定于實驗臺,切開頸部的皮膚,鈍性分離頸部的肌肉,充分暴露氣管,行氣管切開術,模型組(BLM組)緩慢注人5 mg/kg BLM  0.1mL,立即旋轉動物,使藥液在肺內均勻分;對照組同上方法注入生理鹽水0.1 ml,分籠飼養,自由飲水。期間動物會出現背毛凌亂,體重減輕現象,會有少量死亡現象。
 
  模型鑒定
 
  造模14天后,可進行肺部CT觀測。
 
  HE與MASSON肺組織病理檢測觀察
 
  小鼠肺纖維化模型
 
  成年雄性ICR小鼠,體重25-28g,氣管內給藥。稱重小鼠,麻醉后將小鼠仰臥固定于實驗臺,切開頸部的皮膚,鈍性分離頸部的肌肉,充分暴露氣管,行氣管切開術,模型組(BLM組)緩慢注人5 mg/kg BLM  50 μl,立即旋轉動物,使藥液在肺內均勻分;對照組同上方法注入生理鹽水50 μl,分籠飼養,自由飲水。期間動物會出現背毛凌亂,體重減輕現象,會有少量死亡現象。
 
  2、潰瘍性結腸炎模型
 
  小鼠潰瘍性結腸炎模型
 
  6-8周雄性C57BL/6小鼠,予3%DSS常飲法造模,給DSS14天(小鼠每只/天飲水量大約是5ml),構建小鼠結腸炎模型。在 UC 造模期間,每天稱取小鼠體重,觀察小鼠糞便稠度及出血情況,進行 DAI評分,分別就體重降低、糞便稠度、出血三個參數計算 DAI,DAI=(體重評分+糞便稠度評分+出血評分)/3
 
  (a)體重減少%=[-(實驗當天的體重-原始體重)/原始體重*100,0分≤1%,
 
  1 分=1%-5%,2 分=5%-10%,3 分=10%-15%,4 分≥15%];
 
  (b)糞便稠度(0 分:糞便正常,2 分:糞便稀松,4 分:腹瀉);
 
  (c)出血(0 分:陰性未發現,出血情況,2 分:陽性發現出血情況,4
 
  分:發現嚴重出血情況).
 
大鼠潰瘍性結腸炎模型
 
  雄性Wistar 大鼠200-230g,予5%DSS常飲法造模,給DSS14天,構建小鼠結腸炎模型。在 UC 造模期間,每天稱取大鼠體重,觀察大鼠糞便稠度及出血情況,進行 DAI評分,進行 DAI評分,分別就體重降低、糞便稠度、出血三個參數計算 DAI,DAI=(體重評分+糞便稠度評分+出血評分)/3
 
  (a)體重減少%=[-(實驗當天的體重-原始體重)/原始體重*100,0分≤1%,
 
  1 分=1%-5%,2 分=5%-10%,3 分=10%-15%,4 分≥15%];
 
  (b)糞便稠度(0 分:糞便正常,2 分:糞便稀松,4 分:腹瀉);
 
  (c)出血(0 分:陰性未發現,出血情況,2 分:陽性發現出血情況,4
 
  分:發現嚴重出血情況).
 
  3、慢性心衰模型
 
  大鼠慢性心衰模型
 
  Wistar雄性大鼠200g-250g,適應性喂養1周后,阿霉素腹腔注射給藥2.5mg/kg/周,連續給藥6周,超聲心電圖記記錄以下血流動力學參數:心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)、舒張壓(DAP)、收縮壓(SAP)、平均動脈壓(MAP)、左室壓力最大上升及下降速度(±dp/dtmax)進行測定。
 
  小鼠慢性心衰模型
 
  體重在25-30g之間的雄性C57BL/6J小鼠,適應性喂養1周。小鼠在建立模型前8小時禁止飲水及進食,每一只小鼠都要稱體重并記錄下體重值,模型組給予鹽酸阿霉素 (輝瑞制藥有 限公 司)腹腔注射 ,2mg/kg,前 5次每 3d注射1次, 以后每 7d注射 1次 ,累計用量 22mg/kg。給藥10周。采用超聲心動圖檢測小鼠心臟功能:心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)、舒張壓(DAP)、收縮壓(SAP)、平均動脈壓(MAP)、左室壓力最大上升及下降速度(±dp/dtmax)。
 
  4、癲癇模型
 
  大鼠癲癇模型
 
  9周齡健康雄性SD大鼠,海馬區腦立體定位注射20 mM海人酸1μl構建癲癇模型,注射海人酸后即可觀察大鼠行為,觀察時間是4h。海人酸注射大鼠發生的癇性發作按Racine分級標準進行判定:0級,無驚厥;I級,咀嚼、眨眼、立須等面部肌肉抽搐;II級,以點頭運動為主的頸部肌肉抽搐;III級,單側前肢陣攣、抽搐;IV級,雙側前肢陣攣、抽搐伴身體立起;V級,雙側后肢強直,身體背曲強直,跌倒伴全身陣攣。0級為正常,I-III級為癲癇部分性發作,IV~V級為癲癇大發作;凡在觀察時間內連續出現3次IV~V級發作者即為成功癲癇模型。
 
  小鼠癲癇模型
 
  8-10周健康雄性C57BL/6小鼠,將小鼠置于立體定位儀上,根據預實驗摸索并優化麻醉劑用量、海人酸注射量和注射部位的各參數,得到以大腦Bregma為原點的海馬定位注射坐標:-2.0、-1.8、-2.3 mm(右側海馬),進行單側注射海人酸12 mg/kg后,觀察其行為表現。以在急性期出現持續l h以上的III 級以上發作,即為成功癲癇模型。
 
  5、帕金森模型
 
  大鼠帕金森模型
 
  選取雄性 SD 大鼠 ,體質量 250 ~300 g,進行腦立體定位手術,麻醉后,將大鼠頭部固定于腦立體定位儀,顱骨暴露出 2 點,腦黑質坐標:(1)anterior-posterior(AP): 5.2 mm; medial-lateral (ML): 1.9 mm; deep ventral(DV): 8.2 mm, (2) AP: 5.5 mm; ML: 2.4 mm; DV: 7.6 mm,并注入藥物,正常對照組每側注入含0.2%抗壞血酸 0.9%氯化鈉注射液 3 μl,6-OHDA 處理實驗組每側注入濃度為 2.5mg/ml 的6-OHDA 溶液3 μl(溶劑為含0.2%抗壞血酸 0.9%氯化鈉注射液)。
 
  鑒定:(1)大鼠經 6-OHDA 損毀兩周后,在黑暗安靜的環境下腹腔注射 APO 溶液(1mg·kg-1),單獨置于籠內,觀察其行為變化,5min 后開始計算旋轉圈數,以向
 
  健(左)側、首尾相接、環曲 360°者計一圈,記錄 5min,若旋轉>7r·min-1 或>35r·5min-1(*毀損)視為建模成功;旋轉<7r·min-1 或<35r·5min-1(部分毀 損)及 15min 無旋轉或向右側旋轉者均視為建模失敗;(2)HE染色觀察腦組織病理學變化
 
  小鼠帕金森模型
 
  C57BL / 6 雄性小鼠,8 周齡,體質量 20 ~ 22 g,小 將動物固定在立體定位儀(上,沿顱 頂矢狀縫切開皮膚,暴露前囟( Bregma)。 在前囟前 (AP)+0. 5 mm,中線旁(ML) -2. 0 mm(右側) 打孔。 微量進樣器緩慢下行,先后分別在 顱骨下(DV)-3. 0 mm 和-2. 0 mm 各注入 6-OHDA 溶 液 0. 78 μL,速度 0. 5 μL·min-1 ,每次注射完成后需 留針 3 min。 勻速退出進樣器,縫合處理創面。
 
  鑒定:術后的 5 周中,每周腹腔注射 0. 125 g·L-1 的 APO(0. 5 μg·g-1 )觀察動物旋轉情況。 將動物放置在 500 mL 的燒杯里,杯底附新鮮干燥墊料,計數 30 min 內,小鼠向未損傷側的旋轉圈數,每旋轉 360 度記為 1 圈。 統計結果以旋轉次數(rotation·30 min-1 )表示。
 
  6、糖尿病模型
 
  大鼠二型糖尿病模型
 
  8周齡雄性SD大鼠(200g左右),用高脂高糖飼料喂養4周后禁食12小時,腹腔注射配制好的鏈脲佐菌素溶液30 mg/kg,連續注射3天。4天后檢測空腹血糖值,當空腹血糖≥ 11.1mmol/L時,并且高血糖持續兩周且無恢復現象者可作為成功模型。
 
  小鼠二型糖尿病模型
 
  C57BL/6 雄性小鼠(20g左右),用高脂高糖飼料喂養4周后禁食12小時,腹腔注射配制好的鏈脲佐菌素溶液30 mg/kg,連續注射3天。4天后檢測空腹血糖值,當空腹血糖≥ 11.1mmol/L時,并且高血糖持續兩周且無恢復現象者可作為成功模型。
 
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