人α烯醇化酶(α-enolase)ELISA測定試劑盒雙抗體夾心ELISA法定量測定人血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體含量。
液體類標(biāo)本:
包括血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細胞培養(yǎng)上清液等。
血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,如保存過程中如有沉淀,請再次離心。
血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或者肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,在離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
尿液:
用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,當(dāng)細胞濃度達到100萬/ml左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并釋放細胞內(nèi)的成份,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量,加入一定量的PBS(PH7.4),用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆茫瑯?biāo)本融化后仍保持2-8℃的溫度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,分裝后留一份待檢測,其余冷凍備用。
人α烯醇化酶(α-enolase)ELISA測定試劑盒相關(guān)實驗研究:
α烯醇化酶基因調(diào)節(jié)胃癌增殖及其機制研究
摘要:α-烯醇化酶基因(ENO1)是糖酵解過程中的一種代謝酶,催化2-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)化磷酸烯醇式丙酮酸。ENO1在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用,但是尚未有研究報道ENO1在胃癌中的作用,因此其在胃癌中的具體功能和發(fā)揮作用的分子機制有待深入研究。目的檢測ENO1基因在人胃癌組織及癌旁組織中的表達量,研究ENO1基因在胃癌發(fā)生發(fā)展中的重要生物學(xué)功能,并深入探討其參與胃癌發(fā)生發(fā)展的機制。方法1.首先通過免疫組織化學(xué)染色檢測ENO1在胃癌腫瘤組織及癌旁組織中的表達情況,并與TCGA數(shù)據(jù)庫中的結(jié)果進行比較;應(yīng)用Kaplan-Meier法分析ENO1基因表達量與胃癌患者預(yù)后的相關(guān)性。2.應(yīng)用RNA干擾技術(shù)靶向沉默胃癌細胞株ENO1基因的表達,通過CCK8實驗、克隆形成實驗、凋亡實驗、細胞周期實驗及劃痕實驗檢測ENO1對胃癌細胞株生物學(xué)功能的影響。3.應(yīng)用Affymetrix人類全基因表達譜芯片檢測ENO1基因干擾前后胃癌細胞株MGC-803中全基因組mRNA表達豐度。
試劑盒的組成:
(1)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(4)酶的底物;
(5)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),elisa試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
(6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
用途:科研與實驗專用試劑,不得用于臨床診斷。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
標(biāo)本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
相關(guān)產(chǎn)品
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