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(1)將旋光儀接于220V交流電源。開啟電源開關(guān)，約5分鐘后鈉光燈發(fā)光正常，就可開始工作。
(2)檢查旋光儀零位是否準(zhǔn)確，即在旋光儀未放試管或放進(jìn)充滿蒸餾水的試管時(shí)，觀察零度時(shí)視場(chǎng)亮度是否一致。如不一致，說明有零位誤差，應(yīng)在測(cè)量讀數(shù)中減去或加上該偏差值。或放松度盤蓋背面四只螺釘，微微轉(zhuǎn)動(dòng)度盤蓋校正之(只能校正0.5°左右的誤 差，嚴(yán)重的應(yīng)送制造廠檢修)。
(3)選取長(zhǎng)度適宜的試管，注滿待測(cè)試液，裝上橡皮圈，旋上螺帽，直至不漏水為止。螺帽不宜旋得太緊，否則護(hù)片玻璃會(huì)引起應(yīng)力，影響讀數(shù)正確性。然后將試管兩頭殘余溶液揩干，以免影響觀察清晰度及測(cè)定精度。
(4)測(cè)定旋光讀數(shù):轉(zhuǎn)動(dòng)度盤、檢偏鏡、在視場(chǎng)中覓得亮度一致的位置，再?gòu)亩缺P上讀數(shù)。讀數(shù)是正的為右旋物質(zhì)，讀數(shù)是負(fù)的為左旋物質(zhì)。
(5)采用雙游標(biāo)讀數(shù)法可按下列公式求得結(jié)果Q=(A+B)/2
式中:A和B分別為兩游標(biāo)窗讀數(shù)值。如果A=B，而且度盤轉(zhuǎn)到任意位置都符合等式，則說明旋光儀沒有偏心差(一般出廠前旋光儀均作過校正)，可以不用對(duì)項(xiàng)讀數(shù)法。
(6)旋光度和溫度也有關(guān)系。對(duì)大多數(shù)物質(zhì)，用λ=5893A°(鈉光)測(cè)定，當(dāng)溫度升高1℃時(shí)，旋光度約減少0.3%。對(duì)于要求較高的測(cè)定工作，能在20℃±2℃的條件下進(jìn)行。
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