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高效液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。
高效液相色譜儀使用前的準備工作：
1、準備所需的流動相，用合適的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20min。
2、根據待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱（注意方向）和定量環。
3、配制樣品和標準溶液（也可在平衡系統時配制），用合適的0.45μm濾膜過濾。
4、檢查儀器各部件的電源線、數據線和輸液管道是否連接正常。
高效液相色譜儀的開機操作：
①在開機之前，根據所做樣品的方法要求，準備好所用流動相，標樣及樣品。流動相抽濾后超聲脫氣15分鐘，標樣和樣品0.45um膜過濾。
②接通電源，依次開啟A泵、B泵、柱溫箱、自動進樣器、檢測器、系統控制器，待泵和檢測器自檢結束后，打開電腦顯示器、主機，啟動工作站軟件。
③泵排空操作：打開LC-20AT泵排空閥（逆時針90度以上），按Purge鍵，泵開始排空運行。檢查流動相入口Teflon管路沒有氣泡后，再按Purge鍵停止排空。
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