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標液的使用經驗——標準曲線

來源:標液的使用經驗   2021年03月22日 16:44  

標液的使用經驗

在做標準曲線時實驗標準中一般要求先用稀釋劑把濃的標準物質稀釋成幾個濃度點,然后再取同樣體積的稀釋后的各個濃度點的標物,直接進樣或吸附后再解吸進樣,通過色譜儀檢測,采集相應的譜圖用峰面積對濃度作圖,獲得標準曲線。這樣操作存在以下缺點:①要用到稀釋劑和許多定量容器——必然增加實驗費用;②稀釋劑一般是有機溶劑——會增加環境污染;③操作過程復雜——會引入實驗誤差;④如果是標氣——稀釋過程更加復雜和不方便。

 先從色譜儀的定量原理來說,混合物質通過色譜柱分離成單一組分后, 先后到達檢測器,獲得該組分的信號,而信號的大小與組分的多少成正比,象FID檢測器是質量型的,信號強弱與到達較強組分質量成正比。因此我們只要設置幾個質量點,把各個質量點的標物打入色譜儀就可以得到不同峰面積的譜圖,以峰面積對標物質量作圖就可以得到標準曲線。

實現各種質量點的方法可以是上面標準里提到的配制不同濃度標準物質系列,然后同體積進樣的方法。如果把這種方法的思維反過來,做法也同樣也反過來,即標準物質的濃度是相同的,量取的標準物質的體積是不同的。比如說,用同一種標液分別取1μL、0.8μL、0.6μL、0.4μL、0.2μL5種不同的體積的同一濃度的標準物質,這個濃度一般可以使用標準物質的原始濃度,它們所含的標準物質的質量就不同,可以根據標物的濃度計算各個濃度點所含標物的質量,將五個體積的標物打進色譜儀就可以得到相應的五個峰面積。根據標物的質量和峰面積就可以做出標準曲線。

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