（1）材料準備
牛型提純結核菌素、酒精棉、卡尺、1～2．5ml注射器、針頭、工作服、帽、口罩、膠鞋、記錄表、線手套等。如果凍干菌素，還需準備稀釋用注射用水或滅菌的生理鹽水和帶膠塞的滅菌小瓶。

（2）操作方法
①注射部位及術前處理。將牛只編號后在頸側中部上1／3處剪毛（或提前一天剃毛），3個月以內的犢牛也可在肩胛部進行，直徑約lOcm，用卡尺測量術部中央皮皺厚度，做好記錄。如術部有變化時，應另選部位或在對側進行。

②注射劑量。不論大小牛只，一律皮內注射1萬單位。即將牛型提純結核菌素稀釋成每毫升含10萬單位后，皮內注射0．1ml。如用2．5ml注射器，應再加等量注射用水皮內注射0．2ml。凍干菌素稀釋后應當天用完。

③注射方法。先以75％酒精消毒術部，然后皮內注入定量的牛型提純結核菌素，注射后局部應出現小泡，如注射有疑問時，應另選15cra以外的部位或對側重作。

④注射次數和觀察反應。皮內注射后經72h判定，仔細觀察局部有無熱痛、腫脹等炎性反應，并以卡尺測量皮皺厚度，作好詳細記錄。對疑似反應牛應即在另一側以同一批菌素同一劑量進行第二回皮內注射，再經72h后觀察反應。如有可能，對陰性反應和疑似反應牛，于注射后96h和120h再分別觀察一次，以防個別牛出現較晚的遲發型變態反應。

⑤結果判定。
陽性反應 局部有明顯的炎性反應。皮厚差等于或大于4mm以上者，其記錄符號為（+）。對進出口牛的檢疫，凡皮厚差大于2mm者，均判為陽性。
疑似反應 局部炎性反應不明顯，皮厚差在2，1～3．9mm間，其記錄符號為（±）。
陰性反應 無炎性反應。皮厚差在2mm以下，其記錄符號為（一）。

⑥凡判定為疑似反應的牛只，于*次檢疫30天后進行復檢，其結果仍為可疑反應時，經30～45天后再復檢，如仍為疑似反應，應判為陽性。