細胞說明書
細胞名稱: | A20 小鼠B細胞淋巴瘤細胞 | ||
產品貨號: | YS3525C | 規格: | T25瓶或者2ml凍存管 |
生長特性: | 半貼壁生長 | 傳代比例: | 細胞80-90%匯合時 1:2~1:4傳代 |
培養條件: | 90% 1640,10%胎牛血清 ,100U/ml雙抗,37℃、5% CO2 | ||
凍存條件: | 70%基礎培養基+20%FBS+10%DMSO |
僅供科研使用,不可用于臨床診斷和治療
凍存細胞接收后的處理:
1)干冰運輸,收到細胞后立即轉入液氮或直接復蘇;
2)收到細胞后,若發現干冰已經*揮發、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯系。
復蘇細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,請首先檢查培養瓶是否破損或漏液,培養液是否混濁,如有漏液及培養液混濁情況請立即拍照把圖片發給我們。
2)75%酒精消毒瓶身后放培養箱中靜置4-6h后,在顯微鏡下確認細胞狀態并拍照100倍和200倍的照片,若有貼壁細胞脫落,可收集上清離心,將沉淀用新的培養基接種至新的培養瓶或培養皿中。
3)建議收到當天不要消化處理,如果細胞長滿90%,可選擇傳代處理。
4)如您收到細胞3天內沒有反饋相關問題,出現的細胞問題將不提供免費重發服務。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好是進行細胞凍存
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入2ml0.25%胰酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
售后服務告知書
一、收到細胞處理方法
1. 收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置若干小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100×,200×各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行售后的依據。
2. 收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費重發一次細胞。
3. 由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素的影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后是需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后與客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4. 如客戶對細胞的種類、純度、活性等特性有疑問,需提供相應的生物學實驗檢測結果作為依據。
二、細胞出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發;
2. 細胞污染問題,請在收到產品48小時內,給我們提出真實的實驗結果,核實后重發;
3. 常溫發貨的細胞靜置24小時后,干冰凍存發貨的細胞復蘇后24小時后,絕大多數細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態照片),重發;
4. 干冰凍存發貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發貨的細胞靜置4小時候并且未開封,出現污染,重發;
5. 細胞活性問題,請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,核實后予重發;
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產品合格。4-7天內出現問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的,并跟技術人員溝通的,由技術人員判定為我方責任的,重發。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協商處理或者按合同價的50%收費重發。
三、細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?
1. 客戶造成細胞污染,不重發;
2. 客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
3. 非本庫推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
4. 細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;
5. 細胞培養時經其它處理的,不重發;
6. 細胞收到2天內,未告知,不重發;
7. 視具體情況而定。
注意:若對細胞鑒定存在爭議,可以在收到細胞3個月內提供真實有效的STR檢測證明,本公司承諾無條件退還細胞款項,其他情況本公司將不予受理。
免責聲明
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