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木瓜蛋白酶生產的方法

來源:上海吉至生化科技有限公司   2019年07月09日 13:14  

木瓜蛋白酶,又稱木瓜酶,是一種蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜中含有的一種低特異性蛋白水解酶,廣泛地存在于番木瓜的根、莖、葉和果實內,其中在未成熟的乳汁中含量豐富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,屬于巰基蛋白酶,它具有酶活高、熱穩定性好、天然衛生安全等特點,因此在食品、醫藥、飼料、日化、皮革及紡織等行業得到廣泛應用。

由木瓜的未成熟果實,經提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業上以粗制品的應用為主。木瓜蛋白酶韻生產方法有三種,分別是直接熱風烘干法、噴霧干燥法及膜分離凍干法。 

直接烘干

生產方法較簡單、快速,但生產出來的成品只是粗酶,雜質多、色澤差且微生物超標,酶活力也較低,只有60萬~80萬單位/g。多為個體工廠采用,已不能滿足國內食品質量衛生安全等。

噴霧干燥

此法是先通過離心去除部分雜質后再進行噴霧干燥,所生產出的成品酶活力相對高,達到100萬單位/g左右,雜質相對也較少,色澤相對也較白。但產品噴霧時容易粘壁,酶活損失較大,水溶性相對也較差,而且酶活穩定性也較差。

膜分離法

該生產方法不但避免了以上兩種方法的缺點,且生產過程衛生安全,收率也高,所生產的成品酶活損失小,酶活力一般可達到280萬~350萬單位/g,高可達400萬單位/g,且酶活穩定性好,純度高,色澤潔白,細菌數低,嚴格操作可達到醫藥。

其提取工藝條件為超聲波功率300W,超聲處理時間200s,果漿質量分數30%;經超聲波強化提取,酶活力提高到原先的1.71倍;該酶在40℃以下,pH為5.4~6.0時酶活力相對穩定;EDTA、Cys和維生素C對酶活力具有激活作用,CuS04和ZnCl2具有抑制作用,而KCl、NaCI、CaCl2、MgS04對酶活力的影響不大。

木瓜蛋白酶的分離純化工藝

采用初步采集處理,20%、40%硫酸銨分級沉淀、SP-sephadexC50柱色譜、羥基磷灰石柱色譜,從番木瓜乳汁中分離純化木瓜蛋白酶。可獲得比活為1184U/mg的純酶,活力回收率為55.79%,純度達到99.31%,為高純度的木瓜蛋白酶。

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