Tris飽和酚是用Tris-Cl pH8.0飽和過的重蒸酚,為淺黃色透明液體,有刺激性氣味,上層為Tris鹽酸緩沖液,pH>7.8。雖然現在有現成產品出售,但是還是要掌握tris飽和酚配制方法。下面就詳細介紹配制步驟和方法。
Tris飽和酚:
1、冰箱取出重蒸酚,室溫放置---68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂;
2、加8-羥基喹啉0.1%和β-巰基乙醇0.2%,(原液14. 4MOL/ML),混勻,溶液呈現黃色,倒入分液漏斗中(也可在燒杯中進行);
3、加入等溶劑的1MOL/ML的Tris(PH8.0),反復混勻后,靜分層;放出下層黃色酚液,棄上層;
4、加固體Tris約1g/100ml酚,搖勻,去水相;
5、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)平衡數次,PH為8.0;
6、加0.1MOL/MLTris(PH8.0)于棕色瓶中4度保存;
7、如黃色消失或呈粉紅色,則不能使用。
提醒各位老師和同學,Tris飽和酚為有毒、刺激性物體,需要在通風櫥中操作。
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