近來的趙老師在操作小鼠elisa檢測試劑盒實驗的時分發現了一個問題,所以來電我公司的售后部分問道:加完顯色液(購買)顯色必定時刻后,再加停止液(2M H2SO4,自己)后,當即測驗其吸光度值,等過幾分鐘再測驗吸光度值,發現兩次測得的吸光度值發作衰減。第2次均小于*次。而且,加停止液時,從*條加到第12條后,測驗發現,吸光度值從1-12條逐級衰減。條件是這12條酶標板都是同一種產品,而且包被相同蛋白。
ELISA試劑盒通過我公司技能專員的剖析,本來ELISA吸光度值衰減能夠這樣奇妙應對。
其實詳細的原因也很簡單,有可能是顯色液的質量不夠好。一般情況下,停止反響后OD值的下降前期不是很明顯。停止后,吸光度值是會跟著時刻衰減,所以一般是加完停止液后當即測,這樣比較準。再次剖析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是:
① 顯色時刻調整,如果你現在的顯色時刻是10MIN,那調整到30MIN,再加停止液,觀察上述現象是否出現。
② 停止液中加入少量甘油看下怎么樣。建議您運用RD品牌的ELISA試劑盒,顯色時刻是30分鐘,停止后要求在30分鐘內檢測,加入停止液后,在加入停止液后2到3分終內檢測,這是OD值相對比較高。擬合值能達到四個9。
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