多聚甲醛(Paraformalclehyde)又稱固體甲醛,是一類線型短鏈的聚氧甲撐二醇HO(CH2O)nH(式中的n=8--100)混合物,其中還含有少量水份和甲醇。多聚甲醛性狀為甲醛的固體聚合物。白色無定型粉末,有辛辣氣味。 其配制方法如下:
(1)4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸緩沖液(pH7.3)
試劑:多聚甲醛 40g
0.1mol/L磷酸緩沖液 1000ml
配制方法:稱取40g多聚甲醛,置于三角燒瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸緩沖液(Phosphate Buffer以下簡稱PB),加熱60℃左右,持續攪拌(或磁力攪拌)使粉末*溶解,通常需滴加少許1n NaOH才能使溶液清亮,然后補足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混勻。
該固定劑較適于光鏡免疫細胞化學研究,較好是動物經灌注固定取材后,繼續浸泡固定2~24h。另外,該固定劑較為溫和,適于組織標本的較長期保存。
(2)4%多聚甲醛-磷酸二氫鈉/氫氧化鈉
試劑:A液:多聚甲醛 40g
蒸餾水 400ml
B液:Na2HPO4·2H2O 16.88g
蒸餾水 300ml
C液:NaOH 3.86g
蒸餾水 200m
配制方法:A液較好在500ml的三角燒瓶中配制(方法同前),多聚甲醛*溶解后冷卻待用。注意,在溶解多聚甲醛時,要盡量避免吸入氣體或濺入眼內。B液和C液配制好后,將B液倒入C液中,混合后再加入A液,以1n NaOH或1N HCl 將pH調7.2~7.4,后,補充蒸餾水1000ml充分混合,4℃冰箱保存備用。
該固定劑適于光鏡和電鏡免疫細胞化學研究,用于免疫電鏡時,較好加入少量新鮮配制的戊二醛,使其終濃度為0.5%~1%。該固定劑較溫和,適于組織的長期保存。組織標本于該固定液中,4℃冰箱保存數月仍可獲得滿意的染色效果。
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