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紫外可見分光光度計光度重復(fù)性( Photometric Repeatability ) , 又稱光度精密度( PhotometricPrecision) , 是紫外可見分光光度計的很重要的技術(shù)指標(biāo)。它被定義為多次測量( 一般為3～5 次, 有時要求7 次) 中, 大值與小值之差。光度重復(fù)性還表征紫外可見分光光度計分析測試結(jié)果的可靠性。
一、光度重復(fù)性的測試方法
我國1996 年制訂的紫外可見分光光度計國家計量檢定規(guī)程規(guī)定, 光度重復(fù)性要測試3 次, 取3 次中的大小值之差作為光度重復(fù)性。光度重復(fù)性的測試方法是選定一個標(biāo)準(zhǔn)樣品( 也可用使用者自己任選的樣品) , 由同一個操作者,進行3～5 次測試, 再計算光度重復(fù)性。具體操作方法為: 儀器冷態(tài)開機(即關(guān)機2h 后開機) , 預(yù)熱0. 5h 后, 對標(biāo)準(zhǔn)樣品或使用者自選的樣品進行光譜掃描, 而后在譜圖上選擇幾個特征吸收峰, 檢查在選定的測量次數(shù)內(nèi), 各個峰值的大小值之差即為光度重復(fù)性。人們經(jīng)常將光度準(zhǔn)確度和光度重復(fù)性在一次操作中完成。
儀器穩(wěn)定可靠, 其中很重要的一點就是光度重復(fù)性好。可以設(shè)想: 一臺紫外可見分光光度計, 它的功能很強大、自動化程度很高、外形美觀、價格合理, 但它測出的數(shù)據(jù)不能重復(fù), 那肯定不是好儀器。
二、影響光度重復(fù)性的主要因素
影響紫外可見分光光度計光度重復(fù)性的主要因素有以下幾種。
1. 光源系統(tǒng)
光源系統(tǒng)即指燈泡和電源。如果氘燈或鎢燈燈泡本身的質(zhì)量不好, 即使電源很好, 氘燈或鎢燈發(fā)出的光通量肯定不穩(wěn)。這樣, 紫外可見分光光度計就不可能得到好的、穩(wěn)定的測試結(jié)果。如果氘燈或鎢燈的燈泡很好, 但其電源不穩(wěn), 那么光源系統(tǒng)(燈泡) 發(fā)出的光通量也不可能穩(wěn), 也不可能得到好的光度重復(fù)性。
2. 光電轉(zhuǎn)換器系統(tǒng)
光電轉(zhuǎn)換器系統(tǒng)包括光電轉(zhuǎn)換元件( 光電倍增管、光電管、硅光電池等)及其供電電源; 光電轉(zhuǎn)換元件是將光信號轉(zhuǎn)換成電信號的關(guān)鍵元件。不管紫外可見分光光度計的其他元部件( 如光電轉(zhuǎn)換元件的供電電源) 多好, 如果光電轉(zhuǎn)換元件不好( 如它一直在波動或漂移) , 就不可能得到好的光度重復(fù)性。
反之, 如果光電轉(zhuǎn)換元件很好, 其供電電源不好, 電源一直在波動或漂移, 也不可能得到好的光度重復(fù)性。因此, 紫外可見分光光度計的制造者和使用者一定要高度重視光電轉(zhuǎn)換器系統(tǒng)對光度重復(fù)性的影響。
3. 電學(xué)系統(tǒng)(放大器、V/ D 變換等)
如果電學(xué)系統(tǒng)不穩(wěn)定, 也會影響光度重復(fù)性。如放大器有漂移、V/ D 變換不穩(wěn)定, 都會使紫外可見分光光度計的分析測試結(jié)果不會重復(fù)。
4. 環(huán)境
如果周圍有電場干擾、磁場干擾等, 也不可能得到好的光度重復(fù)性。放置紫外可見分光光度計儀器場所的溫度、濕度, 也會影響儀器的光度重復(fù)性。因為儀器的電子元件, 一般都會受溫度的影響而改變其性能。
紫外可見分光光度計的光度重復(fù)性的表示也應(yīng)規(guī)范, 如果光度重復(fù)性設(shè)計指標(biāo)為“0. 001Abs”, 因檢測不出, 5 次測試的結(jié)果全是“0”, 此時正確的表示方法是寫“ 光度重復(fù)性優(yōu)于0. 001Ab s; 或小于0. 001Abs”。
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