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海康NASBA技術平臺-禽流感病毒檢測

來源:海康生命科技有限公司   2017年03月14日 09:46  

NASBA(Nucleic acid sequence-based amplification)技術是一項以RNA 為模板的快速等溫擴增技術,這項技術特別適用于RNA 分子的檢測。其特點是整個擴增過程在恒溫條件下進行,因此不需要特殊(如PCR 儀)的控溫裝置,大大避免了PCR 擴增過程中復雜的溫度變化。

 

于常海教授借助NASBA技術平臺,開發了世界上*個成熟而廣泛適用的禽流感早期快速診斷系統此系統,包括對禽流感各亞型包括高致病性病毒的特異性檢測,為世界上多個國家地區用于禽流感的早期常規篩查和疫情防控, 推動了國內外禽流感疫情監控的發展。

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該技術平臺技術以NASBA病毒檢測系統為中心,在確保高靈敏度、高準確率的前提下,使檢測周期縮短至半天;且無需特殊的昂貴儀器,檢測人員無需特殊技能;它是一個速度快、成本低并且實現了全自動檢測的診斷系統,更重要的是此靈敏的設備適用于資源有限的高感染區,如:條件落后的基層偏遠地區。這些地區也往往是疫情爆發的zui前沿。該技術的應用顯著減少了大面積篩查時的工作量和成本。

由于該技術是恒溫擴增,加上標準化的操作步驟,使不同實驗室所得實驗結果具有很高的可比性。

于常海開發的NASBA技術平臺的*性包括:

NASBA 不會受到抗體存在的影響,能夠區分接種疫苗的生物體中目的病毒存在與否 。

NASBA 在禽流感檢測中能夠區分致病菌株和非致病菌株

對禽流感H5N1病毒的檢測,已經充分的證明:NASBA的靈敏度可以與病毒檢測“金標準”——病毒分離法相媲美。

 

與NASBA相比, 病毒培養方法操作繁瑣、實驗時間長,操作嚴格。即使熟練的技術人員至少需要14天的時間完成整個過程。

使用NASBA技術,在zui適實驗條件下1.5小時能夠擴增1012倍,遠遠高于PCR的109倍的擴增效果。

 

 

于常海教授研發團隊迄今已成功開發出可檢測禽流感群特異性( H1-H15 )(NASBA-AIV)、H5 亞型(NASBA-H5)、H7 亞型(NASBA-H7)的NASBA/ECL 檢測試劑盒。

NASBA 技術操作簡便,自動化水平高,可以減少人為造成的誤差。而且還是一種高通量方法,可以同時檢測50 個樣本,非常適用于大規模樣品的篩查,節省基層使用時的檢測成本。NASBA 技術的擴增產物為RNA 分子,使用者可以根據需要選擇不同的檢測方法,如電化學發光法和酶聯法等。而且,與PCR 的產物DNA 分子不同,RNA 分子不易對實驗儀器和環境造成污染,避免了產物交叉污染實驗儀器、操作環境導致的假陽性結果。適用于NASBA 技術的樣品范圍很廣,除動物組織,血液、體液樣本外,還可對環境樣本進行監測,如禽類飼養場所、交易場所、運輸工具等等,因此為監測和控制禽流感的傳播提 供了有效的依據和手段。

基于NASBA技術檢測平臺的禽流感診斷產品為世界*廣泛使用的禽流感早期快速診斷系統,被列為中國禽流感檢測的國家標準、世界動物衛生組織禽流感檢測推薦方法。該產品通過世界糧農組織和世界動物衛生組織參考實驗室評估驗證,為*在日本政府農林水產省成功注冊的中國疫病檢測產品,也是日本僅有的禽流感檢測注冊產品。該成果在《自然-生物科技》、《柳葉刀》、《病毒學雜志》等刊物上發表12篇SCI論文,獲33項,已應用于檢測SARS、口蹄疫、新城疫、豬瘟等病毒。

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