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穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞構(gòu)建

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更新時(shí)間：2024-11-25 15:55:04

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產(chǎn)品分類品牌分類

實(shí)驗(yàn): 染色實(shí)驗(yàn) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 分子實(shí)驗(yàn) 病理實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 基因測(cè)序蛋白實(shí)驗(yàn) 動(dòng)物模型抗體定制實(shí)驗(yàn) 科研實(shí)驗(yàn) 檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù): 病理染色動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 蛋白組學(xué)技術(shù)服務(wù) 代謝組學(xué)服務(wù) 動(dòng)物模型構(gòu)建分子實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù) 檢測(cè)服務(wù) 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)服務(wù)

服務(wù): 實(shí)驗(yàn)服務(wù)

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產(chǎn)品簡介詳細(xì)介紹

穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞構(gòu)建實(shí)驗(yàn)：用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法或慢病毒侵染的方法將構(gòu)建好的含靶基因的載體導(dǎo)入細(xì)胞，根據(jù)不同的基因載體中所含的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物進(jìn)行篩選混合陽性克隆。在陽性混合克隆的基礎(chǔ)上，得到單細(xì)胞長出的陽性單克隆，繼而得到穩(wěn)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建實(shí)驗(yàn)原理：

穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株是指經(jīng)合適的藥物濃度進(jìn)行藥物篩選后，得到外源DNA穩(wěn)定整合到宿主染色體，并可以長時(shí)間表達(dá)外源目的基因的細(xì)胞。穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株彌補(bǔ)了瞬時(shí)感染(或轉(zhuǎn)染)實(shí)驗(yàn)中外源基因表達(dá)時(shí)間短的缺陷，便于長期觀察。穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞的篩選需根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物，常用的抗性篩選有嘌呤霉素(puromycin)、新霉素(neomycin)等。若實(shí)驗(yàn)需求構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株，我們建議通過慢病毒感染細(xì)胞進(jìn)行藥物篩選的方法，此方法較質(zhì)粒轉(zhuǎn)染可以更加有效的將外源基因整合入基因組，且整合位點(diǎn)處于轉(zhuǎn)錄相對(duì)活躍的區(qū)域，從而獲得更加高效表達(dá)外源基因的穩(wěn)轉(zhuǎn)株細(xì)胞。

穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建實(shí)驗(yàn)服務(wù)選擇：

1、穩(wěn)轉(zhuǎn)株整體服務(wù)(克隆構(gòu)建、病毒包裝穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建、檢測(cè)、單克隆細(xì)胞株篩選)；
2、穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建(穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建、檢測(cè)、單克隆細(xì)胞株篩選)。

穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建檢測(cè)服務(wù)說明

1、穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株以及陰性對(duì)照；

2、穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株鑒定結(jié)果；

3、客戶可免費(fèi)使用已有的細(xì)胞株，若庫中沒有的需要客戶提供；

4、客戶需提供代轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒，也可委托代構(gòu)建。