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1. 體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠，用5% 異氟醚深度麻醉小鼠，然后2.5% 異氟醚維持麻醉。在頸部中線切開一個切口。
2. 分離右側的頸總動脈和迷走神經。右側的頸總動脈暫時結扎。
3. 分離右側的頸外動脈和頸內動脈，右側的頸內動脈暫時結扎；右側的頸外動脈頭端結扎，近心端掛線備用。
4. 隨后，用無菌的1ml注射器針頭在右側頸外動脈上做一個小洞，然后插入線栓，近心端掛線適度的系牢插入右側頸外動脈的線栓，以防止血從小洞中流出；松開右側頸內動脈暫時的結扎線，輕輕送入線栓到大腦中動脈，當感覺到阻力時停止，系牢線栓。縫合皮膚。
5. 60min后，線栓輕輕從大腦中動脈移出，系牢頸外動脈結扎線；然后松開右側頸總動脈暫時的結扎線，小鼠進行再灌注。
6. 48h后神經功能評分，Garcia評分。
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