3D動態(tài)培養(yǎng)通過灌流培養(yǎng),在細胞培養(yǎng)過程中,不斷地將部分培養(yǎng)基取出,同時又連續(xù)不斷地灌注新的培養(yǎng)基,可為細胞提供更好的營養(yǎng)環(huán)境,促進細胞生長,實現(xiàn)長期培養(yǎng),維持細胞與組織功能,并為進一步分化等生長提供良好條件。系統(tǒng)結構簡單小巧,可置于普通二氧化碳培養(yǎng)箱中使用;灌流培養(yǎng)流速、流量、壓力等可調(diào)節(jié),形成不同流體剪切應力環(huán)境適應不同類型細胞培養(yǎng);支持并聯(lián)或串聯(lián)多個灌流槽,進行連續(xù)、長期的動態(tài)循環(huán)灌流培養(yǎng),培養(yǎng)情況可即時通過顯微鏡觀察。
3D動態(tài)培養(yǎng)工藝優(yōu)點是可在發(fā)酵過程中不斷去除細胞碎片和副產(chǎn)物,降低細胞死亡后釋放的各種酶類可能對產(chǎn)物的影響。同時,由于連續(xù)不斷的灌流新鮮培養(yǎng)液而提供一個較恒定的培養(yǎng)環(huán)境,因此可獲得較高的單位體積產(chǎn)率。由于灌流系統(tǒng)多采用細胞截留與回收系統(tǒng),因而可實現(xiàn)細胞的高密度發(fā)酵。
3D動態(tài)培養(yǎng)通氣效率說明:
進行高密度細胞灌流培養(yǎng)時,應特別注意反應器通氣系統(tǒng)的有效性,保證一定的氧傳質(zhì)率,以為培養(yǎng)液提供充足的氧氣,反應器具有出色的氧傳質(zhì)率,可降低對通氣的要求,這可降低尾氣濾器堵塞和罐內(nèi)高壓的風險。同時,反應器需能及時去除高細胞密度所產(chǎn)生的大量的二氧化碳,以避免其抑制生產(chǎn),以為對產(chǎn)物可能造成的負作用。另一個不能忽視的問題是,由于濃縮灌流較高的氣流速率和蛋白含量,在尾氣中可能會有過量的氣溶膠形成,需注意降低尾氣過濾器堵塞風險,提高工藝穩(wěn)定性。
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