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熒光法是一種相對(duì)技術(shù)——也就是說(shuō)，在進(jìn)行定量測(cè)定時(shí)，需要對(duì)濃度已知的材料進(jìn)行比較來(lái)測(cè)定。參比標(biāo)準(zhǔn)物可以是一個(gè)，也可以是一組。使用一組參比標(biāo)準(zhǔn)物的好處在于能夠驗(yàn)證分析實(shí)驗(yàn)是否在線性范圍內(nèi)完成，以及是否存在內(nèi)濾光效應(yīng)（熒光被樣品自身吸收）。觀察到的熒光強(qiáng)度（通常用 RFU ——相對(duì)熒光單位表示）也與儀器的狹縫寬度、檢波器增益（電壓）、光源功率等的設(shè)置有關(guān)。不同的儀器（即使由同一個(gè)生產(chǎn)商生產(chǎn)，且使用看上去*相同的光學(xué)系統(tǒng)）會(huì)給出不同的結(jié)果，并且各個(gè)生產(chǎn)商采用的縱坐標(biāo)尺度不同，因此， RFU 值上存在差異并不能用于儀器的質(zhì)量的評(píng)判。