11
當前位置：上海棱光技術有限公司>>技術文章>>紫外分光光度計組成部件以及測定步驟
紫外分光光度計組成部件以及測定步驟
一、紫外分光光度計作用和組成部件
許多有機化合物在紫外區具有特征的吸收光譜，因此可用紫外分光光度法對有機物質進行定性鑒定，結構分析及定量測定．紫外分光光度法定量測定的依據是比耳定律。首先確定化合物的紫外吸收光譜，確定zui大吸收波長。在選定的波長下，作出化合物溶液的工作曲線，根據在相同條件下測得待測液的吸光度值來確定待測液中化合物的含量。凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物，根據在特定吸收波長處所測得的吸收度，可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200～400nm的紫外光區、400～850nm的可見光區。紫外分光光度計主要由輻射源（光源）、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。
許多有機化合物在紫外區具有特征的吸收光譜，因此可用紫外分光光度法對有機物質進行定性鑒定，結構分析及定量測定．紫外分光光度法定量測定的依據是比耳定律。首先確定化合物的紫外吸收光譜，確定zui大吸收波長。在選定的波長下，作出化合物溶液的工作曲線，根據在相同條件下測得待測液的吸光度值來確定待測液中化合物的含量。凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物，根據在特定吸收波長處所測得的吸收度，可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200～400nm的紫外光區、400～850nm的可見光區。紫外分光光度計主要由輻射源（光源）、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。
二、手動紫外分光光度計與自動紫外分光光度計的區別
手動紫外分光光度計是帶刻度盤顯示波長的，只能用手動調節波長大小。
自動紫外分光光度計是LCD或LED顯示波長的，通過設置鍵選擇需要的波長，再有馬達傳動走到設置的波長。
手動紫外分光光度計是帶刻度盤顯示波長的，只能用手動調節波長大小。
自動紫外分光光度計是LCD或LED顯示波長的，通過設置鍵選擇需要的波長，再有馬達傳動走到設置的波長。
三、紫外分光光度計測定樣品步驟
1、首先，知道所需要測量物質的特征吸收波長是多少，這個可在國家標準、行業標準或其他相關標準或方法。例如測量總氮的話，就需要220和275nm這2個波長，所以必須買紫外的光度計，并且帶雙波長測定功能，例如測總磷是697nm，只需買臺可見光度計就可以了。
2、第二步：知道所測量的物質的實驗方法，需要哪些儀器和設備，還有玻璃器皿等，同時還有比較完成測量所需要的所有化學試劑等。這個可以在標準或實驗方法中找到，基本在互聯網上都可以找到電子版的測量方法。
3、第三步：配置好所需測量物質的標準濃度溶液，一般是5~8個標準溶液，濃度建議從高到低，建議每個不同濃度貼上標簽，以防順序搞錯。注意，部分實驗需要往標準溶液中加顯色劑之后才可以用光度計進行測量。
4、第四步：設置好光度計的測量波長，這就需要熟悉光度計的基本操作，一般測量物質的濃度都是用的標準曲線法，就是對應光度計中的定量測量功能。具體操作時*步，把儀器的波長調整到我們所需要的波長，例如測量總磷直接把波長走到697nm，之后放入裝好蒸餾水的比色皿到樣品室做空白，就是熟稱的調零。第三部把標準溶液放入樣品室，依次測量他們的吸光度，儀器一般會自動記錄之后就會給出標準曲線方程，實驗完畢。如果儀器不能直接記錄吸光度，可以先記在筆記本上，之后用excel軟件進行計算標準曲線。判斷做出的標準曲線是否能用，看哪個R值即那個相關系數，一般zui少做出0.999就可以用了，差一點的儀器也可以做出0.99.
5、第五步：把未知樣品放入樣品室就可以直接測量出樣品濃度。
1、首先，知道所需要測量物質的特征吸收波長是多少，這個可在國家標準、行業標準或其他相關標準或方法。例如測量總氮的話，就需要220和275nm這2個波長，所以必須買紫外的光度計，并且帶雙波長測定功能，例如測總磷是697nm，只需買臺可見光度計就可以了。
2、第二步：知道所測量的物質的實驗方法，需要哪些儀器和設備，還有玻璃器皿等，同時還有比較完成測量所需要的所有化學試劑等。這個可以在標準或實驗方法中找到，基本在互聯網上都可以找到電子版的測量方法。
3、第三步：配置好所需測量物質的標準濃度溶液，一般是5~8個標準溶液，濃度建議從高到低，建議每個不同濃度貼上標簽，以防順序搞錯。注意，部分實驗需要往標準溶液中加顯色劑之后才可以用光度計進行測量。
4、第四步：設置好光度計的測量波長，這就需要熟悉光度計的基本操作，一般測量物質的濃度都是用的標準曲線法，就是對應光度計中的定量測量功能。具體操作時*步，把儀器的波長調整到我們所需要的波長，例如測量總磷直接把波長走到697nm，之后放入裝好蒸餾水的比色皿到樣品室做空白，就是熟稱的調零。第三部把標準溶液放入樣品室，依次測量他們的吸光度，儀器一般會自動記錄之后就會給出標準曲線方程，實驗完畢。如果儀器不能直接記錄吸光度，可以先記在筆記本上，之后用excel軟件進行計算標準曲線。判斷做出的標準曲線是否能用，看哪個R值即那個相關系數，一般zui少做出0.999就可以用了，差一點的儀器也可以做出0.99.
5、第五步：把未知樣品放入樣品室就可以直接測量出樣品濃度。
四、紫外分光光度計連續測量一個樣品，沒拿出來出現吸收值下降原因
這是由于開始外壁上的溶液沒有擦干凈，需檢查一下儀器是否穩定，是否存在儀器造成的基線漂移，如果是同一個比色皿沒有更換待測樣品溶液的話，便是儀器的問題，如果波動范圍為千分之幾的波動誤差，大可以忽略不計。另外，可在此波長下，用純水連續多次測定來觀測機器的穩定性。有可能是儀器不太穩定：1.儀器沒有事先預熱，不穩定；2.光源已經不行啦；3.聚集體隨著時間分解了，感覺不對路兩種可能：氘燈壽命出了問題；重新放入的樣如果不是一個容量瓶的話，建議做下溶液穩定性試驗考慮是否是檢測器的問題，當拿出樣品打開蓋光源遮住。
這是由于開始外壁上的溶液沒有擦干凈，需檢查一下儀器是否穩定，是否存在儀器造成的基線漂移，如果是同一個比色皿沒有更換待測樣品溶液的話，便是儀器的問題，如果波動范圍為千分之幾的波動誤差，大可以忽略不計。另外，可在此波長下，用純水連續多次測定來觀測機器的穩定性。有可能是儀器不太穩定：1.儀器沒有事先預熱，不穩定；2.光源已經不行啦；3.聚集體隨著時間分解了，感覺不對路兩種可能：氘燈壽命出了問題；重新放入的樣如果不是一個容量瓶的話，建議做下溶液穩定性試驗考慮是否是檢測器的問題，當拿出樣品打開蓋光源遮住。