熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發光譜、發射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數，從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數的測定， 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化， 從而闡明分子結構與功能之間的關系。
 

　　熒光計結構示意圖

　　一、激發光源

　　對激發光源主要考慮其穩定性和強度，因為光源的穩定性直接影響測量的重復性和準確度，而光源的強度又直接影響測定的靈敏度。熒光測量中常用的光源包括高壓汞燈或氙燈。氙燈產生強烈的連續輻射，其波長范圍在250~700nm；高壓汞燈發射365 nm、405 nm、436 nm、546 nm、579 nm、690nm和734 nm的線狀譜線，測量中常用365 nm、405 nm、436 nm三條譜線。目前大部分熒光分光光度計都采用150W和500W的氙燈作光源；現代熒光儀器有采用12 V50W的新型溴鎢燈作光源，在300~700nm波段發射連續光譜。此外，20世紀70年代開始用激光作為激發光源，激光光源單色性好、光強度大、脈沖激光的光照時間短，可以避免某些感光物質的分解。

　　二、單色器

　　熒光分析儀器有兩個單色器，激發單色器和熒光單色器)。單色器的作用是將不需要的光除去，使需要的激發光透過而照射到樣品池，第二個濾光片將由激發光所發生的反射光、瑞利散射光、拉曼散射光和由溶液中雜質所發生大多數的熒光濾去。濾光片熒光計采用濾光片做單色器，結構簡單，價格便宜，用于已知組分樣品的定量分析，不能提供激發光譜或熒光光譜。熒光分光光度計都采用光柵分光，可以獲得單色性好的激發光，并能分出某一波長的熒光，以減少干擾，而且可以掃描激發光譜或熒光光譜。

　　三、樣品池

　　熒光分析用的樣品池須用低熒光材料制成，通常用石英，四面均透光。形狀有正方形、長方形或圓形，但常用正方形樣品池，因其散射干擾較少。

　　四、檢測器

　　熒光分光光度計中的檢測器有較高的靈敏度，一般用光電倍增管(PMT)做檢測器。為了消除激發光對熒光測量的干擾，在儀器中，檢測光路與激發光路是相互垂直的。