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比色皿的選擇與鑒別
比色皿的制造工藝有兩種,一種是粘合劑粘合而成,另一種是高溫熔融而成。比色皿的材料通常來源于石英、熔凝硅石和光學玻璃。玻璃比色皿對紫外線幾乎全部吸收,吸光度非常強。而石英比色皿的吸光度則小得多。常用比色皿的形狀有方形、矩形和圓筒形,容量一般為幾毫升。也有用于少量試樣的微型或超微型毛細管皿。另外,還有高、低溫、恒溫比色皿。
比色皿有不同的光程長度,一般常用的有0.5,1,2,3,5cm,選擇哪種光程長度的比色皿,應視分析樣品的吸光度而定。當比色液的顏色較淡時,應選用光程長度較大的如2cm、3cm比色皿;當比色液的顏色較深時,應選用光程長度較小的如0.5cm、1cm的比色皿,以使所測溶液的吸光度在0.1~0.7之間。
1、比色皿有方向性
有些比色皿有方向標記,使用時必須注意。無方向標記的比色皿應予以校正,校正時要先確定方向并作好標記,以減少測定誤差。
2、比色皿的校正方法
將純凈的蒸餾水注入比色皿中,把其中吸收zui小的比色皿的吸光度置為0,并以此為基準,測出其他比色皿的相對吸光度。測定比色液時,應將其吸光度減去比色皿的吸光度。同一組比色皿相互間的差異應小于測定誤差,在測定同一溶液時,吸光度差值應小于0.5%,否則應對差值進行校正。
比色皿的光程長度也需校正,校正時可將吸光度約為0.4的溶液分別注入校正皿和具有準確光程長度的標準比色皿中,測定吸光度。以標準比色皿的吸光度為1.00,求出校正比色皿吸光度的相對值作為該比色皿的校正系數。測定比色皿時,可將所測得的吸光度乘以該皿的校正系數以得到實際吸光度值。
3、石英比色皿OR玻璃比色皿
比色皿選擇或使用不當、造成無法測量或引起測量誤差的現象在實驗中經常出現,這一問題很容易被實驗人員忽視。
紫外區的定義為190~400nm,石英比色皿可用于190~900nm,玻璃比色皿用于360~900nm。紫外區的一定要用石英比色皿,必須配置紫外/可見分光光度計,否則低波長段不能分析。對于一般的非光學專業人員,用眼睛是不能分開石英比色皿和玻璃比色皿的。但兩者硬度差別很大,石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(值)幾十倍,如果把兩個對磨,石英比色皿將很少受到磨損,而玻璃比色皿磨損會非常大。
由于石英比色皿的透光范圍從0.12~4.5微米之間,廣泛的譜段范圍內沒有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4~4微米,且有許多離子吸收峰。所以,石英比色皿要比玻璃比色皿*得多,化驗數據更準確可靠。
用手摸或者肉眼就能觀察出來,只有光學技術人員憑經驗“靠肉眼比較折光率差別”可以準確判定,他們肉眼觀察微弱的離子吸收現象,靠經驗評價也能區分。但是,對于沒有經驗的人員來說,極易發生判定錯誤。
方法1:
石英比色皿上有一個Q字樣(quartz石英),而玻璃的上面有一個G字樣(glass玻璃),從字面上可以直接區分兩種比色皿,如果沒有字樣,只能上機在紫外區實測。在紫外區透過率大是石英的,幾乎沒有透過率的是玻璃的。市面上賣的比色皿造型不是*一樣的,有的沒有石英標識。可在紫外波長下檢測空比色皿的吸光度,玻璃的吸光度要比石英的大。
方法2:
將光度計的波長設定為250nm,樣品室內不放任何物品,調零。然后將比色皿置于樣品道一側,吸光值小于0.07Abs的是石英材料,反之是玻璃材料。
注:如果吸光值稍稍大于0.07Abs的話,有可能也是石英材料的,只不過因為杯子內壁沒有洗凈之故。