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賽默飛離子色譜法測定頭孢呋辛中的乳酸和乙酸

閱讀:819      發布時間:2018-8-15
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頭孢呋辛是由英國葛蘭素公司研發的一個頭孢類抗生素,屬于二代頭孢 菌素。它通過與細菌細胞膜上的青霉素結合蛋白(PBPs)結合,抑制細胞分 裂和生長,后使細菌溶解和死亡。頭孢呋辛具有廣譜抗菌作用,適應范圍 廣,可用于敏感菌所致的呼吸道感染、耳、鼻、喉科感染、泌尿道感染、皮 膚和軟組織感染、骨和關節感染、淋病、包括敗血癥及腦膜等其他感染。

頭孢呋辛鈉一般由7-氨基頭孢烷酸(7-ACA)經過7步反應合成。其中 后一步為由頭孢呋辛酸與異辛酸鈉、乳酸鈉或乙酸鈉成鹽制成[1]。因此測試 成品中的乳酸和乙酸對生產質量控制有重要意義。頭孢呋辛鈉的含量測定一 般采用液相色譜。但由于乳酸和乙酸基本沒有特征紫外吸收,用210 nm 末端吸收測試靈敏度很低。使用離子色譜分離電導檢測則在同樣進樣量下靈 敏度可高一千倍。雖然頭孢呋辛鈉在堿性情況下會降解,但短時降解產物未 產生乳酸及乙酸,因此可以用離子色譜進行測試。

測試條件 儀器: 離子色譜系統:Thermofisher Dionex ICS-2000型離子色譜,帶KOH自動淋洗液發生罐系統及電導檢測器。 分析柱:IonPac AS19(4×250 mm) 保護柱:IonPac AG19(4×50 mm) 淋洗液梯度條件:0~10 min 4 mmol/L,10~21min 4-60 mmol/L,21~25 min 60 mmol/ L,25.1~30 min 4 mmol/L 流速:1.0 mL/min

檢測方法:抑制型電導檢測 進樣量:25 µL 液相色譜系統:UltiMate 3000系列,包括LPG- 3400SD泵,WPS3000SL ANALYTICAL自動進樣器, TCC-3000SD柱溫箱,VWD-3400RS紫外檢測器 分析柱:Acclaim Mixed-Mode WAX-1 淋洗液條件:25 mmol/L KH2PO4(磷酸調為PH3.5) +50%乙腈流速:1.0 mL/min 檢測方式:210 nm紫外檢測 進樣量:20 µL 樣品前處理 稱取0.1 g樣品,溶解到500 mL純水中,0.22 µm濾膜 過濾后直接進樣。

堿性穩定性試驗則為100 mL上述樣品中加入50% NaOH 0.3 mL。每30分鐘取部分進樣一次。 

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