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牛奶中抗生素的檢測方法
一、 牛奶中抗生素的種類
β-內酰胺類
屬于此類的抗生素的有青霉素類和頭孢霉素類,常用于奶牛等家畜的個體臨床治療,殘留在牛乳中。
四環素類
常見種類有四環素、金霉素、土霉素、強力霉素等,是一類廣譜抗生素。
氨基糖苷類
常見種類有慶大霉素、鏈霉素、二氫鏈霉素、新霉素、壯觀霉素等,是常用于家畜的氨基糖苷類抗生素。
氯霉素類
包括以下三種化合物:氯霉素,甲砜霉素,氟甲砜霉素。這類藥物都是嚴格限制使用的獸藥,有些國家禁止使用。
大環內酯類
常見種類有紅霉素、秦樂霉素、林可霉素、螺旋霉素和鹽霉素等。
磺胺類
常見種類有磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺嘧啶等,甲氧芐啶是磺胺增效劑,不單獨使用。
二、抗生素殘留的危害
抗生素的殘留對人體的健康、生態平衡、奶制品價格及奶制品的貿易均有不同程度的危害。
三、牛奶中抗生素檢測方法
1.傳統的微生物檢測法
微生物檢測法出現較早,從出現至今,大大改善了我國抗生素檢測手段的發展,其測定原理是基于抗生素對微生物的生理機能、代謝具有一定的抑制效果,與臨床應用保持一致,相對而言,其耗費的時間久,且存在著較大的誤差,目前zui常應用的是TTC法、戴爾沃檢測(Delvotest SP)法、BY法等。
2.通用的檢測法
相對而言,其是上應用較早的通用測定方法,也是我國制定的監測方法,其原理是:如果牛奶中含有抗生素,則加入菌種(嗜熱鏈球菌)經培育2.5-3h后,加入TTC指示劑(三苯基四氮唑)不發生還原反應,所以樣品呈無色狀態。如果牛奶中不含抗生素,則樣品呈紅色。相對而言,這一方法費用較低,但是耗時,因此應用不算太廣,發展受到一定的限制。
3.藍黃檢測法
該方法是一種廣譜的微生物抑制法,相對而言,耗時短,可以在短時間內檢查出抗生素的殘留情況,只要通過顏色對比既可以得出結論,通過這一檢測方法得到的檢測結果存在著一定的誤差,容易造成誤檢,但是耗時短,費用低。
4.現代儀器分析法
這一方法主要是借助現代儀器進行檢測,測定其殘留的抗生素種類,zui常用的是色譜法、熒光法、毛細管電泳、色譜質譜聯用技術等。運用不同的理論,采用不同的手段進行檢測,提高檢測的標準,加強檢測的質量。相對而言,該方法分離速度快,,實現自動化控制,可以檢測出抗生素的具體含量,其結果更加準確,但待檢樣品需經一系列的預處理,繁瑣費時,還必須有相應的價格昂貴的儀器設備。一般在大型實驗室使用,適合于測定。
5.生化免疫法
這是近年來隨著新科技的發展而逐漸發展起來的,其是以抗原與抗體的特異性與可逆性進行結合,是一種分析就技術?;驹砑揖褪强乖w的競爭性結合,可分為酶聯免疫測定法(ELISA)、熒光免疫測定法(FIA)、免疫分析技術與常規理化分析技術聯用的方法等。幾種方法各有優缺點,必須注重其綜合使用,提高檢測的質量與準確度。從其實踐的結果來看,其對抗生素的殘留現狀檢測效果良好,靈敏度*,達到ng級水平;檢測快速、專一性強。相對而言,此法具有高度的專一性,每檢測一種抗生素就要制備或購買相應的抗原或抗體,導致檢測費用較高。因此生化免疫檢測法不可能取代色譜或光譜等常規分析方法,只能作為其重要的補充。
6.專一試劑盒法
所謂的專一試劑盒法就是根據含有芽孢桿菌的瓊脂培養基和PH指示劑在一定的溫度下進行培養,一般維持在65℃左右,孢子發育生長,降低培養基pH值,在pH指示劑的作用下,藍(紫)色變為綠-黃色。生鮮牛乳中的抗生素殘留使微生物生長和酸的產生受到抑制,由于沒有酸生成,顏色將不會改變。