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HPLC檢測阿拉伯糖
阿拉伯糖屬于五碳醛糖,以阿拉伯聚糖、阿拉伯糖基木聚糖、阿拉伯糖基半乳糖體及類似于高等植物半纖維的形式存在。它是一種沒有熱量的甜料,能抑制水解雙糖的酶,對蔗糖的代謝轉化有阻斷作用,因此,阿拉伯糖具有抑制肥胖、預防并治療糖尿病方面的功效。
阿拉伯糖本身不存在紫外吸收,迄今為止,有關阿拉伯糖含量測定的報道較少。有學者運用ELSD對阿拉伯糖樣品成分含量進行HPLC分析。本文用天津蘭博液相色譜系統配示差檢測器對阿拉伯糖進行了測定,結果顯示該方法簡便、快捷、重現性好、靈敏度高。
測試條件:
儀器
Lanbo 4060液相色譜配示差檢測器(RI2001);
蘭博AS1000自動進樣器;
AXM-8 Temp.柱溫箱;
色譜條件:
色譜柱:SMT氨基柱4. 6 mm × 250 mm,5 μm;
流動相:80%乙腈水溶液
柱溫:30℃;
進樣量:10 ul;
流速:0.8 ml/min。
測試結果:
1色譜圖如下:
圖1 阿拉伯糖的HPLC色譜圖
A:阿拉伯糖
2 線性關系考察 精密稱取阿拉伯糖對照品約2000 mg,置于100 mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,再精密吸取上述溶液1、2、4、5、10 mL,分別至10 mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,制得標準溶液系列。取10 μL進樣,記錄色譜圖,測出阿拉伯糖峰面積(見表1)。得線性方程為:y=3663x+5546,R2=0.999。阿拉伯糖在進樣量為0.02mg~0.2mg范圍內,線性關系良好。
表1 線性試驗測試結果
序號 | 濃度 | 峰面積 | ||
1 | 2 | 79036 | 78692 | 79213 |
2 | 4 | 156203 | 160246 | 158342 |
3 | 8 | 293654 | 287632 | 290365 |
4 | 10 | 369852 | 375621 | 368536 |
5 | 20 | 741724 | 732658 | 746921 |
3 重現性考察 精密吸取濃度為2 mg/mL、4 mg/mL阿拉伯糖對照品溶液10 uL,進液相色譜儀測定,重復進樣5次,記錄峰面積,計算峰面積標準偏差,得到RSD=1.09%。
結論:
糖類成分多不存在紫外吸收,因此經常使用示差檢測器對其進行分析,但是目前關于阿拉伯糖采用示差檢測器分析的報道較少,阿拉伯糖的測定則多采用蒸發光散射檢測器。本文用液相色譜-蒸發光閃射檢測器法測定阿拉伯糖的含量,進行了準確度、本試驗采用天津蘭博液相色譜系統配示差檢測器對阿拉伯糖進行了測定,結果顯示進樣量在線性范圍內線性關系良好,R2=0.999;重現性也較好,RSD=1.09%。