制備色譜相比分析色譜明顯區(qū)別點在于上樣量大
由分析型液相轉為制備型液相,其色譜系統需作多大調整?是否可以按照柱體積折算只改變流速?其上樣量多大為宜?
答:
(1)泵要換,流量要加大,壓力可不變或減少;流通池要換體積更大的。
(2)整個系統的管路要更換更粗的,否則壓力太大,而且特別容易發(fā)生堵塞。對流通池后的管路,最好增加反壓調節(jié)器,否則管路太短的話,反壓小會導致流通池氣泡,管路長的話會導致峰展寬。
(3)檢測器的響應時間和峰寬要設置合適,否則會導致收集時延遲體積的計算不準
(4)上樣量主要根據柱子的大小、樣品的濃度、制備是否根據分析條件放大(例如,制備柱是否還用分析用填料);一般上樣量與柱子直徑的平方以及長度成正比。