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制備色譜相比分析色譜明顯區(qū)別點(diǎn)在于上樣量大
由分析型液相轉(zhuǎn)為制備型液相,其色譜系統(tǒng)需作多大調(diào)整?是否可以按照柱體積折算只改變流速?其上樣量多大為宜?
答:
(1)泵要換,流量要加大,壓力可不變或減少;流通池要換體積更大的。
(2)整個(gè)系統(tǒng)的管路要更換更粗的,否則壓力太大,而且特別容易發(fā)生堵塞。對(duì)流通池后的管路,最好增加反壓調(diào)節(jié)器,否則管路太短的話(huà),反壓小會(huì)導(dǎo)致流通池氣泡,管路長(zhǎng)的話(huà)會(huì)導(dǎo)致峰展寬。
(3)檢測(cè)器的響應(yīng)時(shí)間和峰寬要設(shè)置合適,否則會(huì)導(dǎo)致收集時(shí)延遲體積的計(jì)算不準(zhǔn)
(4)上樣量主要根據(jù)柱子的大小、樣品的濃度、制備是否根據(jù)分析條件放大(例如,制備柱是否還用分析用填料);一般上樣量與柱子直徑的平方以及長(zhǎng)度成正比。