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色譜泵的柱壓出現高低不穩定現象不要慌,從這幾個方面檢查可以確定原因
當遇到色譜泵的柱壓的問題,使用者可能反應是色譜柱出了問題。這里說明一下,并不一定是色譜柱的問題,也可能是儀器系統出現了問題。
1.首先需要確認是儀器系統問題還是色譜柱問題。將色譜柱更換為兩通,開啟色譜泵后,若系統反壓高,說明儀器系統存在問題,若系統反壓歸零或很小,說明色譜柱存在問題。
2.若確認是色譜柱的問題導致柱壓升高時,造成色譜柱柱壓高的原因包括物理顆粒堵塞或化學污染物。
3.當儀器系統存在壓力高的問題時,需要分段排查,可按照柱后端管路、柱前端管路、進樣閥、色譜泵的順序來依次確認是哪里的問題導致,并進行清洗或更換零部件。
色譜泵的柱壓高,情況相對較復雜,下面我們重點講述:
I、樣品沉淀
樣品溶劑與流動相溶劑不一致時,樣品進入色譜柱中時可能會因溶解度下降而出現沉淀,造成柱壓升高。
II、鹽析
使用高濃度緩沖鹽溶液做流動相時,流速設置過低,導致流動相中鹽成分析出;或者使用高濃度緩沖鹽流動相后液相色譜系統(包括色譜柱)沖洗不*,從而導致緩沖鹽溶液流動相中的鹽成分殘留在色譜柱中,再次使用時會出現柱壓高的現象。
III、更換流動相前未充分沖洗系統
當更換流動相時,未*沖洗系統,致使不同性質、互不相溶的流動相存在于一個體系中,也容易導致柱壓升高。對于不同性質、互不相溶的流動相可事先用混溶溶劑(比如異丙醇)沖洗系統再更換新的流動相;在使用含鹽流動相時,須先用不含鹽高比例水相(e.g.有機相:水=10:90)沖洗過渡色譜系統,以防止鹽析堵塞系統而導致柱壓升高。
IV、色譜柱篩板堵塞
較容易導致色譜柱柱壓升高的原因之一為色譜柱篩板或柱頭發生了堵塞,這往往是由于流動相沒有過濾或者雖已過濾但過濾方法不當(比如使用了孔徑過大的濾膜、濾膜損壞、濾膜材質選擇不當等)導致固體雜質顆粒滯留在篩板上造成的。
V、其它
色譜系統故障導致的其它堵塞也會表現為柱壓高,比如:液相泵單向閥堵塞、管路堵塞等。此類情況可以通過拆下色譜柱觀察壓力是否恢復正常的方法進行排查。
色譜泵的柱壓問題具體預防和解決措施:
I.測試樣品溶劑與流動相兼容性以及樣品過濾膜過濾;
II.確認方法參數準確合理;
III.分析強保留樣品或含緩沖鹽的流動相體系,及時沖洗色譜柱;
IV.引入預柱或在線過濾器,減少化學吸附與物理顆粒對色譜柱的污染;
V.更換液相單向閥或堵塞管路。