德國RETSCH公司RM100/KM100碾磨儀在酵母細胞冷凍研磨萃取中的應用
隨著基因研究及相關分析技術的迅速發展,為萃取完整的RNA鏈和RNA序列,尋求一種快速有效的破碎酵母細胞的方法,變得越來越重要。
德國RETSCH公司推出的KM 100 /RM100研缽體研磨儀提供了一種有效的冷凍破碎酵母細胞的方法:
KM100研磨儀
- 樣品zui大進樣尺寸:10毫米
- zui終出樣尺寸:大約0.03毫米
RM100研磨儀
- zui大進樣尺寸:8毫米
- zui終出樣尺寸:大約0.01毫米
細胞淬取前的樣品研磨:
萃取質量和效率的提高直接影響到樣品中蛋白質濃縮的程度. 事實證明,在RM100/KM100研磨儀中加適量液氮的研磨方法得到的細胞樣品較其他破碎細胞方法得到的細胞樣品具有更好的萃取效果。
而萃取的結果又是染色質聚合和RNA聚合酶 Ⅰ、Ⅲ尤其是RNA聚合酶Ⅱ的復制基礎,德國RETSCH公司生產的RM 100、KM 100型槌磨儀就可以勝任這種復雜的應用,因為他們結合了以下優勢:
★ 磨槌的壓力是可以調整并固定的,因此對不同的樣品可選擇研磨力度,并且研磨的結果具有高重復性;
★ 封閉的容器和研磨膛,操作潔凈并安全;
★ 寬范圍的樣品處理量:RM100為10到150毫升,KM100為300毫升;
★ 可在研磨過程中連續加入液氮,保持必要的樣品冷凍研磨,以保證在不損壞RNA, 以達到順利提取蛋白質的目的;
使用RM100和KM100的進行冷凍研磨的具體方法如下:
★ 將鉻鋼研缽和研槌用液氮預冷卻一段時間;
★ 將酵母細胞從塑料注射器中注射到液氮中,使樣品凍結成“面條"狀;
★ 將液氮注射到研缽中,分別開啟RM100和KM100,假如按需要預先裁切好的冷凍樣品;
★ 酵母細胞在適度研磨壓力下被磨成均勻的粉末;
★ 在整個研磨過程中,不斷加入液氮以保持研磨溫度;
★ 大約5到15分鐘后(研磨時間取決于下一步萃取想要達到細胞濃度),即可用預冷的容器回收已破碎好的酵母細胞粉末,以便下一步的萃取處理。
應用領域:
酵母細胞萃取的技術在基因及相關分析的生物學領域中被廣泛采用。并在大量的醫學、制藥、化學實驗室研究中及食品營養工程技術中被采用。
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