| 供貨周期 |
現貨 |
規格 |
1×10^6 |
| 貨號 |
BH3525 |
應用領域 |
醫療衛生,化工,生物產業,制藥 |
HepaRG 人肝癌細胞
產品貨號：BH3525
產品規格：1×10^6
細胞鑒定STR鑒定已通過
細胞來源國外
細胞背景建立于年齡未知的女性丙肝患者。來源于單一供體。
細胞特性 形態：上皮樣,貼壁生長。 用途：僅供科研使用。
HepaRG 人肝癌細胞
細胞鑒定STR鑒定已通過
細胞來源國外
細胞背景建立于年齡未知的女性丙肝患者。來源于單一供體。
細胞特性 形態：上皮樣,貼壁生長。 用途：僅供科研使用。
培養條件1）準備William's E+ FBS 10%+2mM 谷氨酰胺+5.25ug/ml 胰島素+50uM 氫化可的松+P/S 1%
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。注意事項
1.培養密度不要超過80%，密度過高時細胞可能自發分化。
2.包被試劑對這個細胞影響不是特別大。如果用包被試劑會更好，不用的話，貼壁弱一些，但不會影響細胞的狀態，包被試劑包被培養皿讓細胞更好貼壁，推薦使用：Applied Cell Extracellular Matrix (G422)
3.若使用包被試劑，這個細胞消化時間比較長，放在培養箱里消化是 4-6min左右（細胞消化時間與所用胰酶效價、消化時候細胞密度、細胞貼壁強弱以及溫度等因素有關，建議第一次消化時候，多在顯微鏡下觀察，以找到優良消化時間）。
HepaRG 人肝癌細胞貼壁細胞參考：
一. 收貨后消毒靜置待細胞全部穩定后拍照。棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
二. T25瓶加入0.25％EDTA胰蛋白酶1-2ml于培養瓶中震蕩混勻，如果屬于貼壁不牢固的細胞很容易脫落的就培養箱外面消化震蕩等脫落90%以上終止消化，一般小于1分鐘以內，甚至不加胰酶有部分貼壁非常不牢固的細胞也會自然震蕩脫落。如果是貼壁牢固的細胞則置于37℃培養箱中消化提高效率，每40-50秒拿出培養箱震蕩幫助細胞脫落，如果脫落90%以上則對應3-6ml含有10%血清的培養基終止結束，以防胰酶殘留。如果貼壁非常牢固的細胞，脫落的比例比較低，也不超過2分鐘后終止消化結束，再加入1ml培養基讓細胞緩沖后再過2分鐘進行二次消化，反復分步消化以降低單次消化時長，減少刺激，保護細胞膜。或采用刮產刮細胞的方式處理也可以。總歸原則是達到消化目的的同時減少細胞膜受到的損傷越小越好。
三.消化完成后輕輕吹勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶/6cm培養皿中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。期間多的細胞一定保存多份細胞凍存管備種。
運輸形式常溫發貨：收到后T25瓶消毒再放置培養箱靜置2-6小時后觀察密度和狀態并拍照2-3張反饋給銷售，密度達標就可以傳代。前期傳代比例1:2，等再次長滿后傳代時建議凍存其中一整瓶成1個1ml凍存管，另外一瓶繼續傳代，反復凍存足量種子后才擴增做實驗，以防突發情況引起斷種。
干冰發貨：常規細胞發貨凍存管2只，復蘇1只，另外一只備用，第一個復蘇不成功時嚴格按照廠家要求復蘇第二個，均沒有復蘇成功的情況及時留存復蘇照片通知銷售處理售后問題。
生物安全1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。
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