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FastDigest快速限制性內切酶
  • FastDigest快速限制性內切酶
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更新時間:2025-03-03 21:00:07

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2011年12月29日—賽默飛世爾科技近期推出ThermoScientificFermentasFastDigest快速酶,是為快速DNA酶切專門研發的進階版限制性內切酶
    2011年12月29日 — 賽默飛世爾科技近期推出Thermo Scientific Fermentas FastDigest快速酶,是為快速DNA酶切專門研發的進階版限制性內切酶。在30年的內切酶研究當中,我們積累的限制性內切酶生產菌株庫是業內的限制性內切酶生產菌株庫之一。大量可供選擇的同裂酶和優異的生產能力促進了這個包含176種FastDigest快酶的系統的誕生。

    所有FastDigest快速酶在通用的FastDigest緩沖液和FastDigest Green綠色緩沖液中都具有99%活性,并可在5-15分鐘內迅速完成酶切。這就使得任意限制酶組合都能夠在同一反應管中同時反應,避免了連續酶切。此外,FastDigest Green綠色緩沖液兼具上樣緩沖液的功能,可直接將反應物上樣凝膠電泳,操作更為便利。

    FastDigest快速酶可用于酶切質粒、基因組DNA、病毒DNA以及PCR產物。酶切時間和實驗方案已經過實驗驗證,每種快速酶及其作用的模板都有相應的酶切時間和實驗方案提供。FastDigest系列尤其適合對于反應組分純度、性能穩定性和反應體系配制簡單化要求的應用。


    特點
    • 所有FastDigest快酶在通用緩沖液中都具有99%活性
    • 5-15分鐘酶切
    • FastDigest通用緩沖液與所有下游應用99%兼容
    • 直接上樣凝膠電泳
    • 共有176種FastDigest快酶可供選擇


    應用

    • 快速克隆分析
    • 快速制備克隆用DNA
    • PCR產物酶切
    • 快速RFLP基因分型
    • 難切割DNA片段的酶切

    FastDigest 通用緩沖液與所有下游應用99%兼容

    DNA/RNA 修飾酶 在FastDigest緩沖液和FastDigest Green綠色緩沖液中的活性
    DNA Polymerase I, E.coli 99%
    Klenow Fragment 99%
    Klenow Fragment, exo 99%
    T7 DNA Polymerase 99%
    T4 DNA Ligase* 75-99%
    FastAPTM Thermosensitive Alkaline Phosphatase 99%
    T4 Polynucleotide Kinase 99%


    通用緩沖液和直接凝膠上樣

    所有FastDigest快酶在FastDigest Green綠色緩沖液中都具有99%活性。此外FastDigest Green綠色緩沖液中還包含密度試劑和兩種示蹤染料,從而可直接將反應產物添加到點樣孔中。藍色染料在1%瓊脂糖凝膠
    中的遷移率與3-5kb DNA片段接近, 并在424nm時出現激發峰;而黃色染料在1%瓊脂糖凝膠中的遷移速度稍快于10bp DNA片段,在615nm時出現激發峰。

    FastDigest Green綠色緩沖液和無色緩沖液一樣可進行高性能的DNA酶切和下游應用。對于需要用熒光激發進行酶切產物分析的應用(例如,在紫外光下測量濃度),我們建議使用無色的FastDigest緩沖液。



    FastDigest Green綠色緩沖液
    含有FastDigest Green綠色緩沖液的反應混合物
    A: 電泳前,加入點樣孔中的反應混合物;B: 電泳后,在凝膠中得到分離的條帶




    用FastDigest快速酶在FastDigest Green綠色緩沖液中5分鐘內進行質粒DNA的三重酶切和連接
    M:Thermo Scientific Fermentas GeneRuler Express DNA Ladder (#SM1551)
    C:未酶切的質粒DNA對照
    1:在FastDigest緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對質粒DNA進行三重酶切;2:在FastDigest緩沖液中的酶切和連接反應混合物
    3:在FastDigest Green綠色緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對質粒DNA進行三重酶切;4:在FastDigest Green綠色緩沖液中的酶切和連接反應混合物

    5分鐘內酶切DNA

    • 在1種緩沖液中5-15分鐘內可 進行雙重和多重酶切
    • 高通量應用的理想選擇
    • 所有種類的DNA模板都提供相應的酶切時間:質粒DNA、PCR產物、基因組DNA
    • 任何模板都不需要酶切過夜
    • 沒有星活性——無需延長孵育時間

    用FastDigest酶和傳統內切酶進行質粒DNA酶切的比較
    M:GeneRulerTM 1kb Plus DNA Ladder;C:未酶切的質粒DNA
    1:用FastDigest Xhol 5分鐘內酶切質粒DNA;2:用FastDigest ApaI 5分鐘內酶切質粒DNA
    3:用FastDigest Xhol和FastDigest ApaI 5分鐘內雙酶切質粒DNA;4:用Apal酶切質粒DNA 1小時
    5:用Xhol酶切質粒DNA 1小時;6:在1X Tango緩沖液中用4倍的ApaI過量酶切質粒DNA 1小時,然后在2X Tango緩沖液中用XhoI再酶切1小時



    雙酶切可節省超過2個小時


    FastDigest限制性內切酶為DNA酶建立新的標準
    的生產工藝

    所有生產均在符合歐盟指令和ISPE規范標準的D級潔凈空間內進行
    ● 嚴格的質控

    ● 依照ISO9001質量管理體系和ISO14001環境管理體系運作,確保產品均一性和批間重復性
    ● IVD產品生產符合ISO13845管理體系標準
    ● 根據要求進行cGMP生產



    的生產工藝


    FastDigest限制性內切酶應用視頻:/v_show/id_XMzM3MDAxMTcy.html

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