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當前位置:上海求精生化試劑儀器有限公司>>技術文章>>細胞計數板的原理和使用方法
準備細胞計數板、蓋玻片、移液器、細胞懸液等。
確保計數板和蓋玻片清潔、干燥,無劃痕。
將待計數的細胞樣品制備成均勻的細胞懸液。可以通過輕輕吹打、攪拌或使用適當的分散劑來確保細胞均勻分散。
使用移液器吸取適量的細胞懸液,小心地滴加在計數板的計數區域上。注意不要產生氣泡,也不要讓液體溢出計數區域。
通常在計數板的兩側分別滴加細胞懸液,然后輕輕蓋上蓋玻片,使其與計數板緊密貼合。
將計數板放在顯微鏡的載物臺上,使用適當的物鏡進行觀察。一般使用低倍物鏡(如 10×)找到計數區域,然后切換到高倍物鏡(如 40×)進行細胞計數。
計數板上通常有兩種類型的方格:大方格和小方格。大方格又被分為多個小方格。
計數時,只計數位于大方格四個角和中央的中方格內的細胞。對于壓線的細胞,只計數上側和左側線的細胞,避免重復計數。
分別計數不同區域的細胞,取平均值以提高計數的準確性。
根據計數板的規格和計數的細胞數量,可以計算出細胞懸液的濃度。
例如,如果計數板上一個大方格的體積為 0.1mm3,計數了 5 個大方格內的細胞總數為 N,則細胞濃度(個 /mL)=N×10?。
計數完畢后,及時清洗計數板和蓋玻片,避免細胞殘留影響下次使用。
將計數板和蓋玻片干燥后,存放在清潔、干燥的地方。
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