恒溫培養箱無菌控制技術
恒溫培養箱是一種應用領域廣泛、優點眾多的設備,今天我們主要來了解下恒溫培養箱的無菌技控制術。恒溫培養箱是經過在培育箱箱體內模仿構成一個相似細胞/安排在生物體內的成長環境如安穩的溫度(37°C)、安穩的CO2水平(5%)、穩定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對濕度(95%),來對細胞/安排進行體外培育的一種設備。
恒溫培養箱廣泛應用于細胞、安排培育和某些特別微生物的培育,常見于細胞動力學研討、哺乳動物細胞泌物的搜集、各種物理、化學要素的致癌或毒理效應、抗原的研討和出產、培育雜交瘤細胞出產抗體、體外授精(IVF)、干細胞、安排工程、藥物挑選等研討范疇。
外界因素:
在生物活體內,生物體有自身的免疫系統維護細胞或安排,但是在體外培育時,沒有任何維護自個的免疫屏障。關于二氧化碳培育箱的基本參數溫度、CO2 和濕度,大多數培育箱都能滿意研討試驗的需求。但是,關于培育過程中面對的各種污染源,各品牌二氧培育箱的操控方法和作用不盡相同,因而細胞體外培育中zui大的要挾實際上是污染疑問。
恒溫培養箱中的首要污染源:細菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原體、非同種細胞。
關于細胞來說,十分抱負的培育環境相同也合適這些污染物的生計,培育箱自身是不會區分的,而細胞培育中大有些時間里細胞都是坐落培育箱內,因而箱體內能否抑菌或滅菌十分要害!
細菌:細菌污染后,培育基1-2天就會變色,對細胞成長影響顯著,應迅速將污染細胞與其它細胞系阻隔,滅菌后丟掉,還要用試驗室消毒劑消毒培育器皿和超凈臺。
病毒:因為病毒寄生生計,迸發后趕快和正常細胞阻隔,丟掉處置,相對來說簡單處置,對操作者要挾較大;雖然病毒污染的細胞不影響原代培育,但出產疫苗是不安全的。因而,潛在病毒是細胞大量出產和疫苗、干擾素等生物制品制造中的難題