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目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> D3001Dnase I(Rnase free)試劑

Dnase I(Rnase free)試劑
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參考價 400
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
400
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 雅吉生物
  • 型號 D3001
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-11-01 16:51:21瀏覽次數(shù):277評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1000U
貨號 D3001 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合
Dnase I(Rnase free)試劑,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

Dnase I(Rnase free)試劑是將單鏈或雙鏈 DNA 同等程度的隨機分解,生成具有 5′-P 末端寡核苷酸的脫氧核糖核酸內(nèi)切酶。

由于RNase-free DNase I中Protease已幾乎被去除,從而提高了該酶在 pH 中性區(qū)域的穩(wěn)定性。

此外Rnase Free DNase I中添加了Rnase Inhibitor,用于抑制RNA樣品中殘留的RNase核酸酶,

因此可以有效抑制RNA提取過程中Rnase酶對RNA的降解。Stop Buffer終止反應(yīng)后,可通過一步加熱失活DNase I活性。

單位定義

在50 μl體系下,37℃ 10min條件下消化1 μg pBR322質(zhì)粒DNA所需的酶量定義為1個活性單位。

組分

名稱數(shù)量

*Rnase Free DNase I (2 U/μl)500μl

10×RD Buffer1 ml

10× RD Stop Buffer1 ml

*Rnase Free DNase I (2 U/μl)中含有20U/μl的Rnase Inhibitor,故進行消化試驗時不需要再額外添加Rnase Inhibitor。

純度

2U的本酶和1μg的16S, 23S rRNA在37℃、pH7.5的條件下反應(yīng)1小時,RNA的電泳譜帶不發(fā)生變化

儲存

置于-20°C,可保存2年。

使用注意事項

1)通常加熱方法即可失活DNase I。如需要去除殘留的變性蛋白,可在37°C消化完畢后使用酚氯仿抽提并沉淀RNA樣品(不進行加熱操作)。

2)10× RD Stop Buffer中含有螯合劑用于去除二價陽離子,進行加熱失活前,必須加入2 μl 10× RD Stop Buffer并混合均勻,再進行熱失活,否則會導(dǎo)致RNA降解。

3)處理完畢的RNA樣品進行一步反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)時,添加量需要<20%(如20μl的反轉(zhuǎn)錄體系中加入量要<4μl)


Dnase I(Rnase free)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應(yīng)用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,可以看到檢測反應(yīng)<20min(達平臺期)。

b852504c757107ec2ac02ece1e368206.jpg

應(yīng)用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

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應(yīng)用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)


以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒更多產(chǎn)品歡迎咨詢。



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