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液相色譜(HPLC)是一種常用的分離和分析技術(shù),其中基線的穩(wěn)定性對(duì)于數(shù)據(jù)分析至關(guān)重要?;€波動(dòng)可能導(dǎo)致數(shù)據(jù)分析錯(cuò)誤,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。以下是液相色譜檢測(cè)器基線波動(dòng)的一些常見(jiàn)原因及其解決方法。
原因:即使是很小的溫度變化都可能引起基線的波動(dòng),影響示差檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器、較低靈敏度的紫外檢測(cè)器或其他光電類檢測(cè)器。
解決方法:控制好柱子和流動(dòng)相的溫度,在檢測(cè)器之前使用熱交換器。如果柱溫過(guò)高,可以考慮減少柱溫。
原因:流動(dòng)相條件變化引起的基線漂移可能大于溫度導(dǎo)致的漂移。
解決方法:使用HPLC級(jí)的溶劑,高純度的鹽和添加劑。流動(dòng)相在使用前進(jìn)行脫氣,使用中使用氦氣。如果流動(dòng)相不均勻,可以考慮用手搖動(dòng)使混合均勻或使用低粘度的溶劑。
原因:流通池被污染或含有氣體可能導(dǎo)致噪音基線。
解決方法:用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸清洗,但不能使用鹽酸。
原因:檢測(cè)器出口阻塞可能導(dǎo)致流通池窗口破裂,產(chǎn)生噪音基線。
解決方法:取出阻塞物或更換管子。同時(shí),應(yīng)定期檢查流動(dòng)相組成及流速,以避免此類問(wèn)題的發(fā)生。
原因:流動(dòng)相配比不當(dāng)或流速變化可能導(dǎo)致基線波動(dòng)。
解決方法:更改配比或流速。為避免這個(gè)問(wèn)題,可以定期檢查流動(dòng)相組成及流速。
原因:特別是流動(dòng)相發(fā)生變化時(shí),柱平衡慢可能導(dǎo)致基線波動(dòng)。
解決方法:用中等強(qiáng)度的溶劑進(jìn)行沖洗。在分析前用10-20倍體積的新流動(dòng)相 對(duì)柱子進(jìn)行沖洗。
原因:流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成可能導(dǎo)致基線波動(dòng)。
解決方法:檢查流動(dòng)相的組成。使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑。如果流動(dòng)相不兼容,應(yīng)選擇互溶的流動(dòng)相。
原因:樣品中含有強(qiáng)保留的物質(zhì)可能導(dǎo)致基線逐步升高。
解決方法:使用保護(hù)柱。如有必要,在進(jìn)樣之間或在分析過(guò)程中,定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。
原因:使用循環(huán)溶劑可能導(dǎo)致基線波動(dòng)。
解決方法:重新設(shè)定基線。當(dāng)檢測(cè)器動(dòng)力學(xué)范圍發(fā)生變化時(shí),使用新的流動(dòng)相。
原因:檢測(cè)器沒(méi)有設(shè)定在最大吸收波長(zhǎng)處可能導(dǎo)致基線波動(dòng)。
解決方法:將波長(zhǎng)調(diào)整至最大吸收波長(zhǎng)處。
原因:流動(dòng)相脫氣。沖洗系統(tǒng)以除去檢測(cè)器或泵中的空氣。
原因:用手搖動(dòng)使混合均勻或使用低粘度的溶劑。
原因:柱溫過(guò)高或檢測(cè)器未加熱可能導(dǎo)致基線波動(dòng)。
解決方法:減少差異或加上熱交換器。
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