猴蛋白激酶D1(PKD1)ELISA試劑盒

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯吸附試驗（ELISA）。往預先包被相關指標的抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產品包裝：盒裝

性狀：瓶裝液體

規格：96T/48T

保存條件：2-8℃

保存期限：6個月

運輸條件：2-8℃低溫運輸，用干冰或者生物冰袋低溫運輸。

猴蛋白激酶D1(PKD1)ELISA試劑盒

實驗步驟

1. 準備：準備好所有試劑、材料和器具。

2. 溫育：將包被有特異性抗體的酶標板放入37℃溫箱中溫育30分鐘。

3. 加樣：分別向各孔中加入標準品、待測樣本，輕輕混勻。

4. 溫育：將酶標板放入37℃溫箱中繼續溫育30分鐘。

5. 洗滌：清洗酶標板，除去未結合的抗原抗體。

6. 加酶標二抗：向各孔中加入酶標二抗，輕輕混勻。

7. 溫育：將酶標板放入37℃溫箱中繼續溫育30分鐘。

8. 洗滌：清洗酶標板，除去未結合的酶標二抗。

9. 加底物溶液：向各孔中加入底物溶液，輕輕混勻。

10. 顯色：將酶標板放入37℃溫箱中繼續溫育15分鐘。

11. 終止：向各孔中加入終止液，混勻。

12. 測量：在450nm波長下測量各孔的光密度值（OD值）。

試劑盒組成

實驗注意事項

1. 抗原和抗體的儲存：應嚴格按照說明書要求存放抗原和抗體，避免反復凍融和長時間暴露在高溫環境中。同時要保證試劑盒未過期，以獲得可靠的實驗結果。

2. 加樣技術：加樣時應保證加入的體積準確且不產生氣泡，避免加在孔壁的邊緣，以免影響與固相表面的接觸。加樣時應在每孔的旁邊放置一個加樣對照孔，以監測加樣的準確性和重復性。

3. 溫育：溫育是ELISA實驗中的重要步驟，溫育時間和溫度的控制對于抗原抗體反應的進行和結果的影響至關重要。必須嚴格按照說明書要求進行溫育，并注意保持恒溫狀態。

4. 洗滌：洗滌是ELISA實驗中的一步，它可以去除未結合的物質，提高檢測的特異性和靈敏度。洗滌時應保證每次洗滌時間充足，并更換洗滌液以保證洗滌效果。同時要避免在洗滌過程中產生氣泡，以免影響洗滌效果。

結果判斷:

1. 每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖，如設置復孔，則應取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標，標準品的濃度為縱坐標，繪出標準曲線。

2. 推薦使用專業的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據樣品OD值，由標準曲線查出相應的濃度，乘以稀釋倍數；亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

3. 若樣品OD值高于標準曲線上限，應適當稀釋后重測，計算濃度時應乘以稀釋倍數。 

洗板方法

1.手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置 1min 后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板 5次。

2.自動洗板機：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

公司簡介

      上海篤瑪生物科技有限公司是一家國內合資集科研和生產為一體的專業化生物公司。專業提供各類進口品牌，研發生產ELISA試劑盒、細胞株、抗體、耗材、培養基等產品，并提供實驗外包，技術指導，操作指導，代做實驗，代做課題等技術服務。公司擁有研發團隊、研發平臺及現代化的生產基地，生產各類科研用的產品。 我們由衷的感謝海內外科學家、感謝國內外廣大科研工作者、學者予以我們鼎力的支持和理解，我們將在未來的工作中，百尺竿頭，發揮優勢，勇于開拓、自主創新、敢為人先、鍥而不舍，在生命科學的道路上，不斷進取，奮發努力，瞄準國際生命科學的前沿，不斷創新研發新產品。為科研工作提供更好、更人性化的服務。

（Shanghai Duoma Biotechnology Co. , Ltd is a domestic joint venture integrating scientific research and production as one of the specialized biological companies. We specialize in providing various imported brands, R&D and production of ELISA kits, cell strains, antibodies, consumables, culture media and other products, as well as technical services such as experimental outsourcing, technical guidance, operation guidance, experimentation and research. The company has a world-class R&D team, leading technology, cutting-edge R&D platform and modern production base to produce various scientific research products. We are sincerely grateful to scientists at home and abroad, scientific researchers and scholars at home and abroad for their strong support and understanding. In the future work, we will give full play to our advantages, dare to pioneer, independently innovate, dare to be pioneering and persevere, keep forging ahead on the road of life science, strive hard, aim at the frontier of international life science, and continuously innovate and develop new products. Provide better and more humanized services for scientific research.）

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