在細胞培養中，良好的實驗規范和定期檢測支原體污染也十分必要。支原體檢測試劑盒支原體檢測的方法有很多種，如直接培養、DNA 熒光染色、ELISA和PCR法等。支原體檢測試劑盒主要采用PCR方法對各種生物材料（如細胞培養物、實驗動物分泌物、動物血清等）支原體感染的檢測。通過PCR方法檢測培養細胞等生物材料中的支原體，所用引物為根據支原體16S-23S rRNA序列保守區域設計，只特異性擴增支原體 DNA，檢出靈敏度與特異性均較高。PCR擴增及電泳分析只需數個小時，操作方便簡單。

二、產品特點

方法學：PCR法

特點：靈敏、特異、快速，操作簡便

三、產品成分

四、使用說明

(請詳細閱讀使用說明后再開始相關實驗)

1.待測細胞連續傳代3次或培養至兩周；

2.細胞達到80% confluency或以上的時候，取1ml上清，進行低速離心（300g，5min，4℃）；

3.離心結束后取950μl上清液，轉移至新的無菌EP管中，以去除培養基中的細胞；

4.將上清液高速離心（12000g，10min，4℃），離心結束后，去除900μl上清，剩余50ul用以重懸沉淀（可能肉眼不可見）；

5.將重懸好的沉淀放置4度冰箱，作為PCR的模板備用；

根據下表，配制PCR反應液：

★注：為防止Positive Control Template 污染，請將實驗組和陰性對照組加完以后，最后再將C液加入陽性對照組

6.PCR程序

7.制備DNA gel：稱取一定量Argrose粉末，用1X TAE buffer配制成1.5%的DNA GEL；

8.待PCR反應結束后，取8-10μl的PCR 反應液（無需要加 loading buffer）直接進行1.5%瓊脂糖凝膠電泳，確認PCR擴增產物；

9.目的條帶為518bp。示例如下：

五、推薦使用頻率