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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1 kit |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CS-20004-50 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥,綜合 |
產品簡介
詳細介紹
產品介紹
人T細胞活化擴增培養試劑盒是為在體外活化和擴增人T細胞而專門設計的一款含血清培養基套裝。該培養試劑盒可高效活化人幼稚CD4+T或CD8+T細胞，并且達到高效擴增的目的，是研究人T細胞分化和功能的重要培養系統。
產品特點
針對人T細胞的活化和擴增而設計
產品成分
產品名稱 | Cat log # | 規格 | 儲存條件 |
人T細胞活化擴增培養試劑盒 | CS-20004-50 | 1 kit | |
人T細胞基礎培養基 | CS-20004-B | 50ml | 4℃ |
人T細胞活化補充因子 | CS-20004-ATS | 0.35ml | 4℃ |
人T細胞擴增補充因子 | CS-20004-EXS | 0.4ml | -20℃ |
預篩選T細胞專用胎牛血清 | CS-TF-5 | 5ml | -20℃ |
其他本試劑盒未提供但需用的重要試劑和組分
人T細胞磁珠分選試劑
*培養基配制
(在無菌生物安全柜中，開展以下操作)
1.在4℃冰箱解凍補充因子和胎牛血清，混勻后使用。
注：解凍后的補充因子和血清可放置于4℃冰箱，在1個月內使用；或者分裝至合適體積后，保存于-20℃冰箱，不可反復凍融！2.活化培養基配制：將1體積的活化補充因子和4體積的胎牛血清加入到35體積的基礎培養基中，充分混勻，得到人T細胞活化培養基。如取100ul補充因子和400ul胎牛血清加入至3.5ml基礎培養基，以此類推。
擴增培養基配制：將1體積的成熟補充因子和10體積的胎牛血清加入到89體積的基礎培養基中，充分混勻，得到人T細胞擴增培養基。如取100ul補充因子和1ml胎牛血清加入至8.9ml基礎培養基，以此類推。
注：配好的*培養基請于4℃保存，且于1個月內使用完畢。使用說明
(請詳細閱讀使用說明后再開始相關實驗)
1.使用磁珠分選人外周血單個核細胞中T細胞（參考所使用試劑盒的說明書），計數。
注：健康供體每1ml外周血中約含有5-10*10^5 T細胞。2.D0：使用活化培養基重懸T細胞，調整細胞密度至1*10^6/ml，按照如下表格所示將細胞鋪于培養板：
培養板 | *培養基體積 | T細胞數/孔 |
96孔板 | 0.2ml | 0.2*10^6 |
24孔板 | 1.0ml | 1.0*10^6 |
3.將培養板置于細胞培養箱，37℃，5%CO2，靜置培養。
4.D2：補充1/4初始培養體積的新鮮活化培養基（參考步驟2表格）。
注：*培養基請恢復至室溫后使用，減少對細胞的刺激。5.D3：擴孔。
1)收集細胞，離心去除活化培養基，使用擴增培養基重懸，計數；
2)調整細胞密度至5*10^5/ml，按照如下表格將細胞鋪于培養板，繼續擴增培養T細胞：
培養板 | *培養基體積 | T細胞數/孔 |
96孔板 | 0.2ml | 1*10^5 |
24孔板 | 1.0ml | 5*10^5 |
6.D5/D7：細胞計數，按照步驟5所示進行細胞擴增，或收集細胞進行后續操作和分析。
數據展示
圖：人T細胞活化擴增培養鑒定。分選的人CD4+T細胞按照試劑盒說明活化后第三天，顯微鏡下觀察克隆形成（A）；分選的人CD4+T和CD8+T細胞按照試劑盒說明培養至圖示天數，收集細胞計數計算擴增倍數（B）
