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ONPG

MCE 國(guó)際站：ONPG

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號(hào)：HY-15926

CAS：369-07-3

中文名稱(chēng)：2-硝基苯基 β-D-半乳吡喃糖苷

Synonyms：2-硝基苯基 β-D-半乳吡喃糖苷; 2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside

純度：99.84%

存儲(chǔ)條件：粉末 -20°C 3 年 4°C 2 年 溶劑中 -80°C 2 年 -20°C 1 年

運(yùn)輸條件：美國(guó)大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產(chǎn)品活性：ONPG 是一種比色和分光光度計(jì)底物，用于檢測(cè) β-半乳糖苷酶活性。

生物活性：ONPG 是一種用于檢測(cè) β-半乳糖苷酶活性的比色和分光光度底物。 體外該酶對(duì) ONPG 顯示出高水解能力 (100%)，對(duì)其天然底物乳糖 (25.7%) 顯示出中等活性。然而，該酶對(duì)所有其他顯色硝基苯基類(lèi)似物的水解能力非常弱，表明 Gal308 是一種具有窄底物特異性的 β-半乳糖苷酶。研究重組酶的動(dòng)力學(xué)參數(shù)、Michaelis-Menten 常數(shù) (K_m)、轉(zhuǎn)換數(shù) (k_cat) 和催化效率 (k_{cat< /sub>/Km) 的 Gal308 用于 ONPG 和乳糖。 ONPG的kcat和Km值為464.7±7.8 s^-1和2.7±0.3 mM，ONPG為264.2±2.1 s-1 和 7.1±0.8 mM。 ONPG酶的kcat/Km值(172.1 s^-1mM^-1)為比乳糖高4.6倍（37.2 s^-1mM^-1），清楚地表明Gal308對(duì)ONPG的催化效率遠(yuǎn)高于乳糖^[1]。}

激酶實(shí)驗(yàn)：本研究使用 ONPG 和乳糖兩種底物來(lái)測(cè)量 β-半乳糖苷酶活性。通過(guò)跟蹤 ONPG 釋放的鄰硝基苯酚的量來(lái)測(cè)量 ONPG 的 β-半乳糖苷酶活性。反應(yīng)混合物由 100 μL 酶溶液和 400 μL ONPG 溶液（2.5 g/L，100 mM Tris-HCl 緩沖液，pH 6.8）組成。在 78°C 下孵育 15 分鐘后，通過(guò)添加等體積的 1 M Na2CO3 終止反應(yīng)。通過(guò)測(cè)量 A405 定量測(cè)定釋放的鄰硝基苯酚。一個(gè)活性單位定義為在測(cè)定條件下每分鐘產(chǎn)生 1 μmol 鄰硝基苯酚所需的酶量。比活度以每毫克蛋白質(zhì)的單位數(shù)表示。乳糖活性測(cè)定在含有 100 μL 酶溶液和 5% 乳糖的相同緩沖液中進(jìn)行，煮沸 10 分鐘終止反應(yīng)，使用葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶測(cè)定試劑盒測(cè)定葡萄糖濃度。通過(guò)測(cè)量 A492 定量測(cè)定釋放的葡萄糖。一個(gè)酶活性單位定義為每分鐘釋放 1 μmol 葡萄糖所需的活性量[1]。MCE 尚未獨(dú)立證實(shí)這些方法的準(zhǔn)確性。它們僅供參考。

熱銷(xiāo)產(chǎn)品：Idasanutlin  | Trametinib  | Camizestrant  | H-89 (dihydrochloride)  | Ergothioneine  | AZD8797  | Shikonin  | Tarlatamab  | Melatonin  | Oxidopamine (hydrochloride)

Trending products：Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Fluorescent Dye  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds  |  Oligonucleotides

參考文獻(xiàn)：

[1]. Zhang X, et al. Metagenomic approach for the isolation of a thermostable β-galactosidase with high tolerance of galactose and glucose from soil samples of Turpan Basin. BMC Microbiol. 2013 Oct 24;13:237. doi: 10.1186/1471-2180-13-237.