T7 Endonuclease I
MCE 國際站:T7 Endonuclease I
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲條件: -20°C,1 年
簡介:T7 Endonuclease I可識別并切割不完配對DNA、十字型結構DNA、Holliday結構或交叉DNA、異源雙鏈DNA或者以更慢的速度切割含切刻的雙鏈DNA。
概述:T7 Endonuclease I識別并切割不完配對DNA、十字型結構DNA、Holliday結構或交叉DNA、異源雙鏈DNA或者以更慢的速度切割含切刻的雙鏈DNA。該酶切割錯配堿基5’端的第一、第二、或第三個磷酸二酯鍵。
描述:
T7 核酸內切酶 I 可識別并切割不完配對的 DNA、十字形結構 DNA、霍利迪結構或交叉 DNA、異源雙鏈 DNA,或以較慢的速度切割缺口雙鏈 DNA。該酶可切割錯配堿基 5' 端的第一個、第二個或第三個磷酸二酯鍵。
操作說明:1) 分別以突變體DNA和野生型DNA為模板,PCR擴增含突變位點的片段,片段長度約500bp, 突變位點避免位于片段中間,便于區分切割后條帶;2) 變性退火PCR產物3) 酶切反應:上 步反應液中加入0.5 μL T7 E1酶,37℃保溫15-30min,立即加入DNA loading buffer終止反應,混勻后65℃保溫10min,瓊脂糖凝膠電泳檢測酶切結果。
注意事項:1. 用T7核酸內切酶I是一種具有底物結構選擇性的酶。該酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物時,必須控制酶量和反應時間。反應溫度超過42℃時,會增加非特異性核酸酶活性。避免反應溫度超過55℃,會導致酶活性降低。2. 本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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