Not I
MCE 國際站：Not I
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件： -20°C 兩年
簡介：Not I 是經過基因工程重組的快速限制性內切酶，適用于質粒 DNA、PCR 產物或基因組 DNA 等的快速酶切。Not I 的同裂酶有：CciN I。
概述：Not I 是經過基因工程重組的快速限制性內切酶，適用于質粒 DNA、PCR 產物或基因組 DNA 等的快速酶切。Not I 的同裂酶有：CciN I。本產品含通用的 Buffer 和 Color Buffer，其中 Color Buffer 含紅色和黃色示蹤染料，酶切產物可直接用于凝膠電泳。Color Buffer 的紅色染料與 2500 bp 雙鏈DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近；黃色染料與 10 bp 雙鏈 DNA 片段在 1% 瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。
描述：
• Not I 在 10× 緩沖液 和 10× 顯色緩沖液 中 100% 活躍。10× 顯色緩沖液包含密度試劑以及紅色和黃色示蹤染料，可直接將反應混合物加載到凝膠上。顯色緩沖液的紅色染料與 1% 瓊脂糖凝膠中的 2500 bp DNA 片段一起遷移，而顯色緩沖液的黃色染料比 1% 瓊脂糖凝膠中的 10 bp DNA 片段遷移得更快。
• 切割位點：
3'…G C▼G G C C G C…5'
5'…C G C C G G▲C G…3'
操作說明：1. DNA 快速酶切流程1.1 在冰上配制反應體系注：若底物 DNA 為 PCR 產物，建議使用經純化的 PCR 產物。若使用未經純化的 PCR 產物，可將 10× Buffer 或 10× Color Buffer 減少至 2 μL。1.2 輕輕吸打或輕彈管壁混勻反應液。切勿渦旋。瞬時離心收集掛壁液滴。1.3 對于質粒 DNA，37°C 孵育 15 min；對于 PCR 產物，37°C 孵育 15~30 min；對于基因組 DNA，37°C 孵育 30~60 min。1.4 （可選步驟）80°C 孵育 20 min 可使酶失活，停止反應。1.5 若使用 10× Color Buffer，酶切產物可以直接進行上樣電泳。2. 適用于質粒 DNA 的擴大反應體系注：若總反應體系大于 20 μL，可適當增加孵育時間，盡量使用水浴、金屬浴或沙浴。
注意事項：1. 若進行雙酶切或多酶切，每種快速內切酶的用量為 1 μL，且所有內切酶的體積總和不得超過總反應體系的 1/10。可根據需要適當擴大反應體系。2. 若同時使用的幾種快速內切酶的最適反應溫度不同，則應先以最適溫度低的酶開始酶切，再添加最適溫度較高的酶，并在其最適反應溫度下進行酶切。3. 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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