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深圳市艾瑞斯儀器有限公司
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產品介紹
【產品名稱】
通用名：豬口蹄疫病毒A型抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Porcine Foot and Mouth Disease Virus A （ELISA）
【包裝規格】 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
【預期用途】 口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease Virus，FMDV）引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，其特征為口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發生水泡和爛斑。
豬口蹄疫病毒A型抗體檢測試劑盒用于檢測豬血清中口蹄疫病毒A型抗體，可用于口蹄疫病毒A型疫苗免疫效果評價。
【原 理】
本試劑盒由預包被口蹄疫病毒A型抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成，應用酶聯免疫法（ELISA）原理檢測豬血清、血漿樣本中豬口蹄疫病毒A型抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本，經溫育后若樣品中含有豬口蹄疫病毒A型抗體，則將與酶標板上抗原結合，經洗滌除去未結合的其他成分后；再加入酶標記物，與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶標記物，在孔中加TMB底物液，與酶標結合物反應形成藍色產物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；加入終止液終止反應后，產物變為黃色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有口蹄疫病毒A型抗體。
【試劑盒組成】
序號名稱規格/96T×1規格/96T×2規格/96T×5
1酶標記物11ml×1(紅蓋)11ml×2(紅蓋)26ml×2(紅蓋)
2樣品稀釋液50ml×1(黃蓋)50ml×1(黃蓋)200ml×1(黃蓋)
320X濃縮洗滌液40ml×1(白蓋)40ml×1(白蓋)200ml×1(白蓋)
4底物液A6ml×1(白蓋)11ml×1(白蓋)26ml×1(白蓋)
5底物液B6ml×1(黑蓋)11ml×1(棕蓋)26ml×1(黑蓋)
6終止液6ml×1(黃蓋)11ml×1(黃蓋)26ml×1(黃蓋)
7陽性對照1.0 ml×1(紅蓋)1.5 ml×1(紅蓋)2.0 ml×1(紅蓋)
8陰性對照1.0 ml×1(綠蓋)1.5 ml×1(綠蓋)2.0 ml×1(綠蓋)
9酶標板96T×196T×296T×5
10蓋板膜125
11自封袋112
12說明書111
13稀釋板125
【儲存及有效期】 2～8℃保存，有效期12個月。
包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個月。
【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標儀，37℃恒溫設備，可調微量移液器。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條，設陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻，蓋好蓋板膜，置37℃（推薦水浴）避光反應30分鐘。
5.甩去孔內液體，每孔加350ul工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，最后一次拍干。
6.每孔加酶標記物100μl，蓋好蓋板膜，置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，蓋好蓋板膜，置37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值。
【參考值】 實驗正常的情況下，陰性對照的平均OD值即ODNC應≤0.3，陽性對照的平均OD值即ODPC應≥0.6。
【檢驗結果的解釋】
1.樣品的OD值即ODS；
2.閾值計算：SP值=（ODS-ODNC）/（ODPC-ODNC）；
SP值≥0.2，結果判定為陽性；SP值＜0.2，結果判定為陰性。
3.本實驗結果為陰性時表明豬只抗體水平不足，建議補打相應疫苗。
【試驗方法的局限性】
該試驗僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬口蹄疫病毒A型抗體，根據A值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。
【注意事項】
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴格健全和執行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性，應避免接觸皮膚和衣物，如不
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