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深圳市艾瑞斯儀器有限公司
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原理及用途
赭曲霉毒素是曲霉菌屬和青霉菌屬的某些種產生的二級代謝產物。其中赭曲霉毒素A在自然界分布最廣，毒性最強，對人類和動植物影響最大。
深圳艾瑞斯生產的采用間接競爭ELISA方法檢測米面、花生、大豆等谷物及飼料樣本中的赭曲霉毒素(Ochratoxins A，OTA)，試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的赭曲霉毒素和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗赭曲霉毒素抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含赭曲霉毒素含量成負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中赭曲霉毒素的殘留量。
技術指標
1 試劑盒靈敏度：1ppb(ng/ml)
2 反應模式：37℃，30min～30min～15min
3 檢測下限：
谷物…………………………5ppb
飼料…………………………10ppb
4 交叉反應率：
赭曲霉毒素A…………………………………100%
5 樣本回收率：
谷物及配合飼料…………………………85%±15%
酶聯免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
1 編 號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應：加標準品應用液或樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加抗體工作液50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，37℃避光反應30分鐘。
3 洗 滌：小心揭開蓋板膜，甩去孔內液體，每孔加350ul工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，最后一次拍干（用吸水紙拍干，拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
4 加酶反應：加酶標記物100µl/孔，37℃避光反應30分鐘。
5 洗 滌：同上
6 顯 色：加底物液A 50µl/孔，再加底物液B 50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，37℃避光顯色15分鐘（若藍色過淺，可適當延長反應時間）。
7 終 止：加終止液50µl/孔，輕輕振蕩混勻，終止反應。
8 測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應在終止反應后10分鐘內完成。
