蛋白質水解檢測技術服務詳情介紹

自然界中發(fā)現(xiàn)的蛋白質大小從5kDa到400kDa不等。蛋白質水解過程將蛋白質切成較短片段，即肽段，蛋白質水解是肽質譜鑒定分析之前至關重要的一步，是蛋白質鑒定和表征、生物標記物的發(fā)現(xiàn)成功進行的基礎。盡管質譜可以研究完整的蛋白質，但是較小的肽更容易進行蛋白質鑒定。且可提高蛋白質的覆蓋率，因為蛋白質覆蓋率由于溶解性和異質性可能會降低。因此，zuì常見的蛋白質組學方法往往會利用位點特異性酶切位點來產(chǎn)生較小的多肽片段。質量較小的肽段更容易通過高效液相色譜（HPLC）和HPLC偶聯(lián)質譜進行分離和表征。

BTP-蛋白質水解服務

百泰派克生物科技提供兩種水解蛋白質的方法：（1）凝膠內(nèi)水解（聚丙烯酰胺凝膠基質中的蛋白質水解）；（2）溶液內(nèi)水解（蛋白質在氯仿/甲醇中沉淀，然后在尿素中再溶解后進行）。通過一維或二維凝膠電泳分離的蛋白質，可直接在凝膠內(nèi)進行水解，凝膠內(nèi)水解，有效且可重現(xiàn)好，但比較費力費時。相較于凝膠內(nèi)水解，溶液內(nèi)水解方法更省力，所需的時間較少，但溶液內(nèi)水解的蛋白，蛋白的再溶解度低，可能會導致一定的樣品損失。

蛋白質水解的流程

百泰派克生物科技可同時提供凝膠內(nèi)水解和溶液內(nèi)水解兩種蛋白質水解相關服務。蛋白質水解的工作流程包括： 1. 制備裂解液； 2. 溶液內(nèi)或凝膠內(nèi)進行酶切; 3. 使用離液劑（如尿素和胍）使蛋白質變性； 4. 使用DTT還原二硫鍵； 5. 使用碘乙酸或碘乙酰胺將半guāngānsuān烷基化； 6. 去除試劑和交換緩沖液； 7. 在適當?shù)膒H和溫度下，用yídànbáiméi或其他蛋白酶在碳酸氫銨緩沖液中過夜變性約18小時； 8. 加入酸類物質終止酶切。 9. 蛋白質富集/清洗。

樣品要求 百泰派克生物科技可處理各種類型的樣本，包括但不限于： 天然來源的蛋白質； 重組來源的融合蛋白和標記蛋白； 不同亞型的抗體； 膜蛋白及其他。

蛋白質酶切的優(yōu)點

• 靈活性：我們提供凝膠內(nèi)和溶液內(nèi)水解兩種蛋白質水解策略； • 高準確性和覆蓋范圍：我們的水解服務可以大大提高質譜分析的準確性和覆蓋范圍。 • 應用廣泛：可促進蛋白質的鑒定和表征，發(fā)現(xiàn)疾病的生物標志物，并有助于理解生物學過程。 • 完整的蛋白質組學服務：我們提供完整的蛋白質組學服務，涵蓋蛋白質組學分析的整個過程，可對水解后的樣品進行分析測定，一站式為您解決組學問題。 百泰派克生物科技還提供高通量自動化蛋白質水解服務，歡迎咨詢。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對蛋白質序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對蛋白質的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質，提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優(yōu)勢：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、蛋白質組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標記物;

2.體內(nèi)體外多種蛋白質標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統(tǒng)準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數(shù)據(jù)轉換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。

※服務優(yōu)勢：

1.技術優(yōu)良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優(yōu)質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務；

3.業(yè)務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質的生物質譜分析服務!

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