常見樣本處理及要求：

【血清樣本】：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4℃過夜，然后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注意事項：收集血液樣本應避免溶血，因為紅細胞在溶解時會釋放具有過氧化物酶活性的物質，這種情況下，ELISA實驗中將會出現非特異性顯色反應，導致檢測結果不準確，出現假陽性結果。另外，樣本還應避免細菌污染，因為細菌可能含有內源性HRP，也會導致檢測結果不準確。

【血漿樣本】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注意事項：檢測前請仔細閱讀ELISA試劑盒說明書，查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被肺特異性X蛋白（LUNX）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肺特異性X蛋白（LUNX）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

實驗前準備要點：

1. 準備各種實驗儀器及材料（如：37℃恒溫箱，450nm酶標儀、高速離心機、高精度加樣器及槍頭等等）

2. 按照生物實驗室安全防護條例，穿著實驗服并佩戴乳膠手套做好防護工作

3. 使用前應將試劑盒內各試劑取出，平衡至室溫（至少30分鐘）

4. 嚴格按照說明書的操作方法進行操作。說明書以英文說明書為準。

我司ELISA檢測試劑盒分為96T和48T兩種規格。96T試劑盒可檢測90個樣，48T試劑盒可檢測42個樣。

人肺特異性X蛋白(LUNX)科研ELISA試劑盒組成及其配置：

洗板方法：手工洗板方法：甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

人肺特異性X蛋白(LUNX)科研ELISA試劑盒的注意事項：

1） 充分混勻對保證反應結果很重要，在加液后請輕輕晃動整個96板孔，以保證混勻。

2） TMB溶液請勿接觸氧化劑或金屬，否則容易失效。

3） 加樣時請注意每個樣品或標準品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。加樣過程中必須避免氣泡的產生。

4） 檢測標準品和樣品時建議設置重復孔，以確保檢測結果的可信度。

5） 洗滌過程非常重要，洗滌不充分會下降并導致結果誤差較大。

說明：

1.      由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，本產品可能存在一定的質量技術風險。

2.      最終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關，請務必準備充足的標本備份。

3.      不同批次的同一產品可能會有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據試劑盒內說明書進行實驗操作，網站電子版說明書僅作參考。

4.      只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到最佳的檢測結果。