在生物學實驗中，同一抗體在不同條件下進行電泳等分析時，跑出來的分子量卻不一樣，常常會出現這樣的事情。有以下幾個方面因素：
一、抗體本身的結構特點
抗體是具有4條多肽鏈的對稱結構，包含2條較長、相對分子量較大的相同重鏈（H鏈）和2條較短、相對分子量較小的相同輕鏈（L鏈），鏈間由二硫鍵和非共價鍵聯結形成一個由4條多肽鏈構成的單體分子 。抗體存在多種形式，除了常見的單體形式，還可以形成多聚體。比如，IgM抗體在體內通常以五聚體形式存在，而在某些實驗條件下，其聚合狀態可能發生改變，從五聚體解離成單體或其他聚合程度不同的形式。這種聚合狀態的變化會直接影響其在電泳等分析中的遷移率，從而表現出不同的分子量。
二、翻譯后修飾也會影響抗體分子量
抗體在細胞內合成后，會經歷一系列的翻譯后修飾過程，其中糖基化最為常見。不同的細胞表達系統，由于其自身的糖基化酶種類、活性以及細胞內環境等因素的差異，會導致抗體糖基化程度不同。
以在哺乳動物細胞和昆蟲細胞中表達的同一抗體為例，哺乳動物細胞表達的抗體可能具有更復雜、多樣化的糖基化修飾，而昆蟲細胞表達的抗體糖基化程度相對較低。糖基化的差異會使抗體的分子量增加不同的程度，進而在電泳等實驗中呈現出不同的分子量結果。此外，磷酸化、乙酰化等其他翻譯后修飾方式，也在一定程度上改變抗體的電荷性質和分子大小，影響其在電場中的遷移行為，造成分子量測定的差異。
三、實驗操作因素
1. 樣品處理不當：樣品在制備過程中可能被部分降解或修飾，導致出現額外的條帶。
2. 電泳條件不一致：凝膠濃度、電泳緩沖液、電泳時間等條件不一致，可能導致蛋白質遷移速度不同。
3. 轉膜效率不均：轉膜過程中某些蛋白質可能沒有wan全轉移到膜上，導致信號不均勻。
四、抗體特異性問題
抗體交叉反應：抗體可能與非目標蛋白發生交叉反應，識別出其他分子量的蛋白質。
多克隆抗體：多克隆抗體可能識別目標蛋白的多個表位，包括不同修飾狀態或片段的表位。
五、 蛋白質表達差異
細胞或組織特異性：不同細胞或組織中，同一蛋白質的表達水平和修飾狀態可能不同，導致分子量差異。
六、 實驗誤差
樣品污染：樣品可能被其他蛋白質污染，導致出現額外的條帶。
試劑問題：使用的試劑（如抗體、標記物等）可能存在問題，影響實驗結果。
解決方法
優化實驗條件：確保樣品處理、電泳、轉膜等步驟的一致性和準確性。
使用特異性更高的抗體：選擇經過驗證的高特異性單克隆抗體。
進行對照實驗：使用已知分子量的標準品和陰性對照，幫助解釋結果。
驗證結果：通過其他實驗方法（如質譜分析）驗證目標蛋白的分子量和修飾狀態。
在進行實驗時，我們需要充分考慮這些因素，盡可能優化實驗條件，準確分析實驗結果，以獲得可靠的抗體分子量數據。
天津益元利康生物科技有限公司：
（一）輻射五大服務方向：
1. 國內試劑耗材經銷代理；
2. 國外試劑訂購（直訂，或境外代理）；
3. 基因組測序（二代，二代+三代）；
4. 基因分型（SNP檢測）：低/中/中 高通量項目；
5. 生物樣本運輸（國內、）；
（二）多家代理品牌，涉及30多種較有名品牌，經營代理500多個品牌：
Qiagen、Sigma、R&D、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific、
Matreya、Sage Science、List Labs、Macrocyclics、Steraloids、NIBSC、mobio、immunodx、cellsystems、medicago、abcam、CST、Roche、Bethyl、sino Biological、clodrosome、adi BIO-WORLD、TOKU-E、HYPHEN BioMed、moltox、ZeptoMetrix International Humic、biocytex、Toxin Technology、Streck、Elastin、biomax、Orflo Technologies、Accegen、Advbiomart、genlantis、Cygnus Technologies LLC、Enzyme Research、Bio/Data Corporation、Greer Lab 、Solarbio、bangslabs、bioline、musechem、hyphen-biomed、polyplus、moltox 、exiqon、pentapharm、verichemlabs、GenStar、ALZET、lucernatechnologies 、meridian、origene、horizon discovery、Reagents、megazyme、elisasystems………
所有生物試劑耗材都可以進口，特別是冷門品牌，均能給客戶購買到。價格優，貨期短，可加急，快10天到貨；保證服務質量，所有產品均提供售后服務。大部分客戶我們提供貨到付款服務，
公司自成立依靠過硬的服務和良好的信譽與各大企事業單位、科研單位建立長期合作。客戶包括北大，清華，地大，中科院各所，各大藥企等等。
專業訂購國內外試劑耗材，常備現貨，一手貨源，歡迎合作。
4
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務