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碧云天脂質氧化MDA檢測試劑盒(S0131S)現貨供應

閱讀:977      發布時間:2024-3-4
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碧云天的脂質氧化MDA檢測試劑盒(Lipid Peroxidation MDA Assay Kit)是一種用于測量脂質氧化水平的試劑盒。它采用一種基于MDA和硫代ba比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反應的顯色方法來產生紅色產物,然后通過比色法對血漿、血清、尿液、動植物組織或細胞裂解液中的MDA進行定量檢測。這種試劑盒被廣泛應用于脂質氧化水平的檢測。

MDA(丙二醛)是生物體脂質氧化的天然產物。當動物或植物細胞經受氧化應激時,脂質氧化便發生。脂肪酸在氧化過程中會逐漸分解為一系列復雜的化合物,其中包括MDA。通過測量MDA的水平,我們可以了解脂質氧化的程度,因此MDA的測定被廣泛用作脂質氧化水平的指標。除了氧化應激反應外,生物體內的其他生化反應也會產生MDA,例如thromboxane synthase也能催化其產生,但只要在測定時設置適當的對照,就能觀察到脂質氧化水平的變化。

以碧云天的脂質氧化MDA檢測試劑盒(Lipid Peroxidation MDA Assay Kit)為工具,通過檢測MDA水平,可以準確評估生物體的脂質氧化程度。這種試劑盒符合脂質氧化水平檢測的需要,并且在科學研究和臨床應用中得到廣泛應用。

使用說明:

1. 樣品的準備:

a. 血漿、血清或尿液樣品制備后可以直接用于MDA測定。

b. 組織或細胞可以使用PBS裂解液進行勻漿或裂解。對于組織,組織重量占勻漿液或裂解液的比例為10%;對于細胞,每100萬細胞使用0.1ml裂解液或勻漿液。勻漿或裂解后,10,000g-12,000g離心10分鐘取上清用于后續測定。對于一些特殊樣品,離心不能獲得澄清的上清溶液的,可以使用0.2微米孔徑的過濾器過濾以獲得澄清的樣品溶液。勻漿或裂解等樣品制備步驟宜在冰浴或4℃進行操作。

2. 試劑盒的準備工作:

a. TBA儲存液的配制:稱取適量TBA,用TBA配制液配制成濃度為0.37%的TBA儲存液。例如18.5mg TBA用5ml TBA配制液配制,或者25mg TBA用6.76ml TBA配制液配制,最終濃度即為0.37%。TBA配制液需wan全溶解后再使用,可以加熱到70℃以促進溶解。TBA儲存液較難溶解,需加熱到70℃,并通過劇烈Vortex以促進溶解。配制好的TBA儲存液室溫避光保存,至少3個月內有效。

3. 樣品測定:

a. 在離心管或其它適當容器內加入0.1ml勻漿液、裂解液或PBS等適當溶液作為空白對照,加入0.1ml上述不同濃度標準品用于制作標準曲線,加入0.1ml樣品用于測定;隨后加入0.2ml MDA檢測工作液。

b. 混勻后,100℃或沸水浴加熱15分鐘。加熱時務必注意避免液體暴沸濺出。如果使用加熱塊(Heat block)進行加熱注意用重物壓緊離心管蓋;如果使用沸水浴,則需使用可把蓋子鎖死的離心管或螺旋蓋離心管,或用Parafilm封住離心管口,用針頭刺一小孔。zui方便和準確的加熱方法是使用帶有熱蓋并可以加熱0.5ml PCR管的PCR儀。

c. 水浴冷卻至室溫,1000g室溫離心10分鐘。取200微升上清加入到96孔板中,隨后用酶標儀在532nm測定吸光度。如果不方便測定532nm的吸光度,也可以測定530-540nm之間的吸光度。可以設定450nm為參考波長進行雙波長測定。

d. MDA含量的計算:對于血漿、血清或尿液等樣品可以直接根據標準曲線計算獲得MDA的摩爾濃度,對于細胞、或組織樣品,計算出樣品溶液中的MDA含量后,可以通過單位重量的蛋白含量或組織重量等來表示最初樣品中的MDA含量,例如μmol/mg蛋白或μmol/mg組織。

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S0131S

脂質氧化(MDA)檢測試劑盒

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